基因重组和基因工程
GeneticRecombinationandGeneticEngineering;第一节
自然界DNA重组和基因转移是经常发生的
DNARecombinationandGeneTransferOccurFrequentlyinNature;第二节
重组DNA技术
又称DNA克隆或分子克隆;;一、重组DNA技术相关概念;技术水平:分子克隆(molecularclone)
(即DNA克隆)
细胞克隆
个体克隆(动物或植物);应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA)与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子(replicon),继而通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增提取获得大量同一DNA分子,也称基因克隆或重组DNA(recombinantDNA)。;目的:
①分离获得某一感兴趣的基因或DNA
②获得感兴趣基因的表达产物(蛋白质);(二)工具酶;限制性核酸内切酶(restrictionendonuclease);与甲基化酶共同构成细菌的限制修饰系统,限制外源DNA,保护自身DNA。;第一个字母取自产生该酶的细菌属名,用大写;
第二、第三个字母是该细菌的种名,用小写;
第四个字母代表株;
用罗马数字表示发现的先后次序。;(三)目的基因(targetgene);(四)基因载体;质粒(plasmid);第14章基因重组和基因工程药事情;二、重组DNA技术基本原理;以
质
粒
为
载
体
的
DNA
克
隆
过
程;(一)目的基因的获取;目的基因;受体菌条件:
安全宿主菌
限制酶和重组酶缺陷
处于感受态(competent);抗药性标记选择,免疫化学方法等。;(插入失活法)
抗药性标记选择;重组DNA技术操作过程可形象归纳为:;重组DNA技术操作的主要步骤;表达体系的建立:
表达载体的构建
受体细胞的建立
表达产物的分离纯化;第三节
重组DNA技术与医学
的关系非常密切并前景远大;一、疾病基因的发现与克隆;基因工程胰岛素;基因诊断(geneticdiagnosis)是利用分子生物学及分子遗传的技术和原理,在DNA水平分析、鉴定遗传疾病所涉及基因的置换、缺失或插入等突变。又称DNA诊断。;(二)基因治疗的概念;1.产前诊断
2.携带者测试
3.症候前诊断
4.遗传病易感性;细菌染色体;;转基因生物的生产;Carolinacottonproducershavereducedpesticide
spraysandloweredproductioncostsbyutilizinggenetically
engineeredcottonvarieties
;第14章基因重组和基因工程药事情;基因工程培育抗虫棉的简要过程:;第14章基因重组和基因工程药事情;小结
;谢谢聆听!