第2课时微生物的选择培养和计数;导学聚焦;你知道吗?
1.在被石油污染的土壤中可以筛选_______________微生物。
2.在冰川冻土层可以筛选_____________微生物。
3.漆酶属于木质降解酶类,分离产漆酶菌株的首选样品是生活污水吗?_______________;
讨论:
1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的?
2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢?;(一)选择培养基
在微生物学中,___________________的微生物生长,同时____________________微生物生长的培养基。
原理:人为提供___________________的条件(包括________、________和________等),同时_____________________________;思考·讨论选择培养基配方的设计
尿素[CO(NH2)2]含氮量高,化学性质稳定,是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素施入土壤后,会被土壤中的某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶。脲酶催化尿素分解产生NH3,NH3可以作为细菌生长的氮源。;现学现用:;思考:
怎么证明一个选择培养基具有选择性呢?
提示:应该设置基础培养基(如牛肉膏蛋白胨培养基)或完全培养基作为对照,若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数多于该选择培养基,则该选择培养基具有选择性。;(二)微生物的选择培养
1.方法
应采用______________________。
2.方法概述
由于土壤细菌的数量庞大,要想得到特定微生物的纯培养物,必须要对土壤进行_________,然后再将菌液_____到制备好的___________上;
两个基本操作:___________和___________;3.操作流程;3.操作流程;待涂布的菌液被____________后,将平板______,放入___________中培养_____d,在涂布有___________菌液的平板上就可以观察到分离的________;;注意:
1.10g土样加入盛有90mL无菌水中后,已稀释10倍,在计算时,不要忽略;
2.由于使用的是选择培养基,所以一般情况下,获得的单菌落即目的菌,但因为有些微生物可以利用目的菌的代谢产物来生长繁殖,所以还需要进一步验证;
3.过程中所有操作都应在酒精灯火焰旁进行;
4.将涂布器从酒精中取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后再放在火焰上灼烧;不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中,以免引燃酒精。;小结:两种接种方法的比较;(三)微生物的数量测定
1.间接计数法——稀释涂布平板法
(1)原理
当样品的稀释度足够_____时,培养基表面生长的一个______,来源于______________中的一个_______;通过计数平板上的______数,就能推测出样品中大约含有多少______;
*样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目;;(2)计数原则*
①选择菌落数为_________的平板计数**;
②_______稀释度下,应______对____个平板进行重复计数,然后求出_________;
③计算
C代表某一稀释度下平板上生长菌落数的平均值;
V代表涂布平板时吸取的稀释液体积数值(mL);
M代表稀释倍数;
则每克样品中的细菌数=___________________;现学现用:
某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均数为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)()
A.2.34×108B.2.34×109
C.234D.23.4;(3)结果分析
统计的菌落数往往比活菌的实际数目________;
原因*:______________________________________________________
统计结果一般用________而不是用活菌数来表示;;思考:
某两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下两种统计结果:甲同学在该浓度下涂布了一个平板,统计的菌落数为230;乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板,统计的菌落数分别为21、212、256,该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。
请评价这两位同学的实验结果的有效性:
1.甲同学___________________________________________________;
原因是___________________________________________________;
2.