试验四果蔬菜中农药残留测定
环境工程 李婷婷 2110921109
一、试验目的
1、练习使用农药残留快速检测仪，把握其操作过程；
2、把握酶抑制法的试验原理。
二、试验原理
本试验承受酶抑制法，有机磷或氨基甲酸酯类农药能抑酶活性，使本可以由酶参与的显色反响而失去颜色，呈白色。可用比色法定量抑制程度。抑制率是有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制酶力量的强弱。
在肯定条件下,有机磷和氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关。
正常状况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物与显色剂反响。产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率。通过抑制率可以推断出样品中是否含有高剂量有机磷和氨基甲酸酯类农药的存在。
三、试验步骤
参数设置
校准测量：选择校准菜单后，取2.5ml试剂一移入比色瓶后，
各取
1/5
100ul试剂二和试剂三倒入比色瓶中，盖紧摇匀,放入比色槽中放置
10min，按校准键，仪器显示正在预热，仪器发出嘀嘀嘀三声后，表示校准完毕。
空白测量：接上步，按空白测量键，仪器显示正在预热，发出嘀嘀嘀三声后，提示参加试剂四，取出比色瓶参加100ul试剂四，盖好摇匀，放入比色瓶中，按回车连续，仪器显示正在测量，倒计时三分钟，完毕后同样发出嘀嘀嘀三声。并显示吸光度值A1，A2。
样品测量
样品制备：选取有代表性的果蔬样品，擦去外表泥土，叶菜用叶菜取样器取叶片局部，果实蔬菜可切割。然后切成1cm左右的见方碎片，称取2.0g样品。
样品中农药的提取：将6个样品提取瓶放在支架上，各放入2.0g样品，各加10.ml试剂一，用搅拌针使样品全部浸入液体中，放入提取仪中萃取6分钟。之后放回支架，取2.5ml注入比色瓶中。
样品测量：选择测量键，各加100ul试剂二和试剂三混合摇匀。按确认键进展测量，预热完毕后。仪器显示正在培育。10分钟后完毕，发出嘀嘀嘀三声。提示参加试剂四。参加后，按确认键三分钟后，屏幕显示结果。
四、试验结果与分析
抑制率公式：
E〔%〕={[(A2-A1)-(A4-A3)]/(A2-A1)}×100%
E：抑制率
A1：空白测量3分钟前的吸光度值A2：空白测量3分钟后的吸光度值A3：样品测量3分钟前的吸光度值A4：样品测量3分钟后的吸光度值
结果判定：当被测样品的抑制率在50%以上时，表示被测样品中有高剂量有机磷和氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果，阳性结果的样品需要检测两次以上。对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确定农药品种的含量，并报有关部门处理。
试验所测样品为豆角，经试验测得：A1=-0.029，A2=0.617，A2-A1=0.6460.300，所以空白有效。A3=0.329，A4=1.1171.8，所
以此样品检测有效。抑制率为4.1%，小于50%，所以样品检测一次即可。
五、问题与争论
本次试验中应留意的问题有以下几点：
1、试剂二用量：假设A2-A1小于0.300，此空白无效，需要重检测，假设屡次测定后，仍小于0.300，则需要增加试剂二的用量，直到大于为止。
2、吸光度确认：在样品测量完毕后。假设A4大于1.80，则此样
品检测无效，需重检测，屡次测量后仍大于
1.80，为果蔬色素干扰，需要对被测样品进展整株提取，不要剪碎样品。
3、留意时间间隔：提示参加试剂四时应当在嘀嘀嘀三声后参加(空白和样品)。且做空白和样品时参加试剂四的时间间隔应全都。参加试剂四后,轻轻摇匀后,放入比色槽后,应马上测量。
4、留意移液器的操作：移液器有两个档,吸取时应用第一个档,排解液体时下推至其次个档。
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