基因工程模拟考试题（含答案解析）
一、单选题（共20题，每题1分，共20分）
1.促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：
A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感
B、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化
C、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用
D、人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定
正确答案：B
答案解析：促红细胞生成素是一种糖蛋白，其合成过程需要在内质网和高尔基体等细胞器中进行糖基化修饰。大肠杆菌是原核生物，没有内质网和高尔基体等细胞器，无法对人的促红细胞生成素进行糖基化修饰，导致生产出的促红细胞生成素不具有生物活性，所以不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生成素。
2.如果没有得到PCR产物，下面哪个不是导致扩增失败的原因?
A、可能没有加入酶
B、DNA解链不充分
C、人工合成的引物错误
D、减少循环周期次数
正确答案：D
答案解析：如果没有得到PCR产物，扩增失败的原因可能有多种。选项A中没有加入酶会导致无法进行扩增反应；选项B中DNA解链不充分会影响引物与模板的结合，进而影响扩增；选项C中人工合成的引物错误也无法正确引导扩增。而选项D减少循环周期次数一般不会直接导致扩增失败，只是可能会使扩增产物量减少，不是导致完全没有PCR产物的原因。
3.AUG是唯一识别甲硫氨酸的密码子，它具有下列哪种重要作用？
A、作终止密码子
B、作起始密码子
C、作肽链释放因子
D、识别tRNA部位
正确答案：B
答案解析：起始密码子是指信使RNA上开始编码蛋白质的第一个密码子，AUG是常见的起始密码子，它编码甲硫氨酸，在翻译起始时，核糖体小亚基会识别mRNA上的起始密码子AUG，然后与mRNA结合并开始翻译过程。而终止密码子是UAA、UAG、UGA，它们不编码氨基酸，而是使翻译过程终止；肽链释放因子是帮助识别终止密码子并促使肽链从核糖体上释放的蛋白质；识别tRNA部位的是核糖体的特定结构域，而不是密码子AUG本身。
4.S1核酸酶的功能是：
A、切割双链的DNA
B、切割单链的RNA
C、切割发夹环
D、以上均正确
正确答案：D
答案解析：S1核酸酶可以切割双链DNA、单链RNA以及发夹环等结构，所以以上选项均正确。
5.在质粒提取的步骤里，异戊醇的作用是：
A、使蛋白质脱水
B、使DNA脱水
C、减少气泡，有助于相的稳定
D、帮助DNA进入水相
正确答案：C
答案解析：异戊醇的作用主要是减少气泡，有助于相的稳定。在质粒提取过程中，加入异戊醇可以降低表面张力，使离心过程中产生的气泡减少，从而使有机相和水相之间的界面更加清晰、稳定，有利于后续的分层等操作，便于更好地分离出质粒DNA等物质。
6.基因工程菌中重组质粒的丢失机制是：
A、重组质粒渗透至细胞外
B、重组质粒被细胞内核酸酶降解
C、重组质粒在细胞分裂时不均匀分配
D、重组质粒杀死受体细胞
正确答案：C
答案解析：重组质粒在细胞分裂时不均匀分配会导致部分子代细胞中不含有重组质粒，从而造成重组质粒的丢失。选项A中重组质粒一般不会轻易渗透至细胞外；选项B中如果被细胞内核酸酶降解那就不是丢失而是被破坏了；选项D重组质粒通常不会杀死受体细胞，所以ABD均不符合。
7.Southern印迹的DNA探针杂交：
A、只与序列完全相同的RNA片段
B、可与任何含有相同序列的DNA片段
C、可与任何含有互补序列的DNA片段
D、可与用某些限制性核酸内切酶切DNA片段
E、只与含有互补序列RNA片段
正确答案：C
答案解析：Southern印迹的DNA探针杂交原理是利用核酸分子碱基互补配对原则，探针可与任何含有互补序列的DNA片段进行杂交。
8.用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为：
A、染色体DNA断成了碎片
B、染色体DNA分子量大，而不能释放
C、染色体变性后来不及复性
D、染色体未同蛋白质分开而沉淀
正确答案：C
答案解析：在碱法分离质粒DNA时，染色体DNA会变性，但由于其分子量大，复性速度慢，在溶液恢复中性时，质粒DNA已快速复性并保持可溶状态，而染色体DNA来不及复性，会与蛋白质等一起形成沉淀，从而被除去。选项A中染色体DNA不是断成碎片；选项B不是因为分子量大不能释放；选项D染色体是与蛋白质分开后沉淀的，且不是不能释放而是来不及复性沉淀。
9.哪一个载体适用于150kbDNA片段的克隆？
A、质粒
B、λ噬菌体载体
C、BAC
D、YAC
正确答案：C
10.Sanger法测序的基本步骤不包括：
A、标记模板
B、模板-引物杂交
C、引物的延长与合成阻断
D、电泳
E、放射自显影直读图
正确答案：A