ICS11.220CCSB41
团体标准
T/CVMA245—2025
小反刍兽疫病毒间接磁微粒CLIA抗体
检测方法
Indirectmagneticparticlebasedchemiluminescenceimmunoassayfordetectingantibodiesagainstpestedespetitsruminantsvirus
2025-5-19发布2025-5-19实施
中国兽医协会发布
I
T/CVMA245—2025
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中国兽医协会提出并归口。
本文件起草单位：兰州兽研生物科技有限公司、中国农业科学院兰州兽医研究所、内蒙古自治区动物疫病预防控制中心、宁夏回族自治区动物疾病预防控制中心。
本文件主要起草人：林密、蒙学莲、包艳芳、李峰松、蒋韬、孙跃峰、李涛善、许福玲、朱学亮、王建龙、李知新、潘晓乐、特木尔巴根、郭宇、王玉梅、周海宁。
1
T/CVMA245—2025
小反刍兽疫病毒间接磁微粒CLIA抗体检测方法
1范围
本文件描述了小反刍兽疫病毒间接磁微粒CLIA抗体检测方法。
本文件适用于小反刍兽疫病毒抗体检测。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T27982小反刍兽疫竞争ELISA方法
NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
CLIA：化学发光免疫分析法（chemiluminescenceimmunoassay）
ELISA：酶联免疫吸附试验（EnzymeLinkedImmunosorbentAssay）
RLU：相对发光值（relativelightunit，RLU）
5技术原理
本方法以磁微粒作为固相载体，在反应过程中形成磁微粒-抗原-抗体复合物，利用酶促化学发光作为免疫学反应的信号放大系统，读取发光值（RLU），通过四参数公式拟合的校准曲线计算小反刍兽疫病毒N蛋白的抗体浓度。
6试剂
6.125×浓缩洗液，按照附录A中的A.1配制。
6.2磁微粒工作液（偶联小反刍兽疫病毒N蛋白的磁性微粒）。
6.3稀释液，按照A.2配制。
2
T/CVMA245—2025
6.4酶标抗体工作液（碱性磷酸酶标记兔抗羊IgG）。
6.5小反刍兽疫病毒抗体工作校准品：包括工作校准品1、工作校准品2、工作校准品3、工作校准品
4、工作校准品5、工作校准品6，抗体含量分别为0U、12.5U、50U、200U、800U、3200U，按照附录B制备。
6.6小反刍兽疫病毒抗体质控品：质控品1抗体含量≤20U，质控品2抗体含量范围为160U～240U，按照附录C制备。
6.7化学发光底物。
7仪器设备及耗材
本方法应准备仪器设备及耗材如下：
——全自动化学发光免疫分析仪：磁微粒酶促化学发光检测设备；
——电子天平：最大称量：Max=220g；最小称量：Min=10mg；显示分度值：d=0.1mg；
——离心机：最高转速：16000r/min；
——可调单道移液器（10μL~100μL、100μL~1000μL）；
——1.5mL/2mL离心管；
——反应杯；
——试剂船。
8检测前准备
8.1样品采集及处理
样品采集按照NY/T541的规定进行。无菌注射器静脉采血，不少于2mL，用自然析出法分离血清后，置于无菌血清管中，若在一周内检测，可置2℃~8℃条件下保存，若超过一周检测，应置于-20℃以下保存。血清样本运输时应注意2℃~8℃冷藏。
注：若样品中存在沉淀或絮状物等杂质，需8000r/min，离心2min后再进行检测。
8.2溶液配制
8.2.1洗液：将25×浓缩洗液用无离子水或蒸馏水1:25倍稀释，装入洗液桶