【九科星押题合集】考向3：细胞工程综合

科研人员利用体细胞核移植技术成功克隆了一只森林猫，过程如下：从成年雌性森林猫皮肤组织中分离出成纤维细胞，将其细胞核注入去核的中华田园猫卵母细胞中，激活后形成重构胚并移植到受体母猫体内，最终获得克隆后代。此外，为预防克隆猫感染猫泛白细胞减少症（猫瘟热），研究人员拟制备针对该病毒的单克隆抗体。请回答下列问题：

（1）分离成纤维细胞时，需用________酶处理皮肤组织以分散细胞。作为受体细胞的卵母细胞需培养至________期，克隆后代的性别为________，原因是________。

（2）制备单克隆抗体时，灭活病毒的作用是________。若融合后的杂交瘤细胞仅能分泌普通抗体，可能的原因是________。

（3）在重构胚激活过程中，通常采用________法模拟自然受精后的生理状态。若克隆胚胎移植后未能发育，推测可能的生物学原因是________（答出一点即可）。

（4）与胚胎细胞核移植相比，体细胞核移植技术更难成功，从表观遗传学角度分析，原因是________。

【参考答案】

（1）胰蛋白酶或胶原蛋白；MⅡ中（减数第二次分裂中期）；雌性；克隆后代的核遗传物质完全来自供体细胞核（雌性森林猫的细胞核）

（2）诱导细胞膜融合；未成功筛选出针对目标抗原的单一B淋巴细胞（或B淋巴细胞未特异性识别抗原）

（3）电脉冲（或钙离子载体）；受体母猫子宫环境与克隆胚胎发育不同步（或重构胚基因表达异常）

（4）体细胞的分化导致DNA甲基化等表观修饰更复杂，难以完全重编程

【解析】

（1）题解析：

第一空：胰蛋白酶或胶原蛋白酶用于分解细胞间质，使细胞分散。

第二空：MⅡ中期的卵母细胞含大量MPF，可驱动核进入分裂状态，促进供体核重编程。

第三空和第四空：性别由供体核的性染色体决定（XX），故后代为雌性。

（2）题解析：

灭活病毒通过膜融合诱导细胞融合，若融合后抗体非特异性，可能因免疫小鼠的B淋巴细胞未针对目标抗原激活。

（3）题解析：

电脉冲或钙离子载体可激活重构胚；胚胎发育失败可能与母体环境不兼容或基因表达异常有关。

（4）题解析：

体细胞分化后表观遗传修饰（如DNA甲基化）更复杂，导致核重编程困难，成功率降低。