********************第1页，共29页，星期日，2025年，2月5日目的与要求了解病毒的诊断，抗病毒治疗，病毒感染的预防。第2页，共29页，星期日，2025年，2月5日第一节病毒感染的检查方法第3页，共29页，星期日，2025年，2月5日病毒感染的检查检测内容查病毒查特异性抗体病毒颗粒病毒抗原病毒核酸病毒酶类：如逆转录酶电镜直接观察光镜检查包涵体分离培养第4页，共29页，星期日，2025年，2月5日一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，但应注意：1.标本用“双抗”或两性霉素B处理2.低温保存，尽快送检3.血清学诊断采双份血清第5页，共29页，星期日，2025年，2月5日二、病毒的分离与鉴定（一）病毒的分离培养细胞培养（cellculture）鸡胚接种（egginoculation）动物接种（animalinoculation）第6页，共29页，星期日，2025年，2月5日1.鸡胚培养采用孵化9～14天的鸡胚绒毛尿囊膜痘苗病毒、人类疱疹病毒尿囊腔接种部位流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔流感病毒的初次分离卵黄囊嗜神经病毒第7页，共29页，星期日，2025年，2月5日第8页，共29页，星期日，2025年，2月5日1、鸡胚培养优点：易管理，不带微生物，成本较低缺点：操作程序复杂第9页，共29页，星期日，2025年，2月5日第10页，共29页，星期日，2025年，2月5日2.动物接种应用：尚无敏感细胞的病毒培养动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等优点：结果易观察，可建立动物模型缺点：有饲养条件要求，费用高，动物体内常带有潜伏病毒第11页，共29页，星期日，2025年，2月5日病毒的分离培养3.细胞培养单层细胞培养（monolayercellculture）分类悬浮细胞培养（suspendedcellculture）原代细胞（primarycell）细胞种类二倍体细胞（diploidcell）传代细胞系（continuouscellline）第12页，共29页，星期日，2025年，2月5日病毒的细胞培养细胞培养瓶单层细胞第13页，共29页，星期日，2025年，2月5日1．病毒增殖鉴定(1)细胞病变效应（cytopathiceffect,CPE）①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等（多数病毒）；②形成多核巨细胞或称融合细胞（麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培养细胞中形成包涵体（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。（二）病毒的鉴定第14页，共29页，星期日，2025年，2月5日①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落第15页，共29页，星期日，2025年，2月5日麻疹病毒感染细胞呼吸道合胞病毒感染细胞②形成多核巨细胞或称融合细胞(1)细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)第16页，共29页，星期日，2025年，2月5日③形成包涵体(inclusionbody)(1)细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)第17页，共29页，星期日，2025年，2月5日腮腺炎病毒感染细胞(2)红细胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋红细胞表面HA受体第18页，共29页，星期日，2025年，2月5日(3)干扰现象（interference）风疹病毒＋人胚肾细胞病毒增殖，CPE(－)埃可病毒＋人胚肾细胞病毒增殖，CPE(＋)＋人胚肾细胞风疹病毒？埃可病毒CPE(-)—风疹病毒(+)埃可病毒(-)CPE(+)—风疹病毒(-)埃可病毒(+)第19页，共29页，星期日，2025年，2月5日2.病毒数量与感染性测定1.蚀斑形成试验（plaqueformationtest）2.50％组织细胞感染量