团体标准
标准编号：
化妆品温和刺激性实验（斑马鱼）实验方法
xxxx-xx-xx发布xxxx-xx-xx实施
XXXX发布
目次
前言3
化妆品温和刺激性实验（斑马鱼）实验方法7
1.范围4
2.定义4
3.规范性引用文件4
4.检测原理4
5.实验材料与试剂4
5.1.材料4
5.2.试剂4
5.3.对照品错误！未定义书签。
6.实验仪器与设备5
7.实验步骤5
7.1.实验准备5
7.2.样品处理5
7.3.对照组溶液5
7.4.实验方法6
8.结果计算6
9.质量控制7
前言
本标准按照GB/T1.1-2020给出规则起草。
本标准提出和归口：
本标准起草单位：
本标准主要起草人：
1.范围
本标准规定了化妆品温和刺激性检测斑马鱼鱼胚实验的实验原理、实验准
备、实验方法、实验结果和实验报告。
本标准适用于评价液态水基类化妆品原料及其产品温和刺激性检测。
2.定义
hourspost-fertilization（hpf）：受精后小时数
3.规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅
注日期的版本适用于本文件，凡不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所
有的修改单）适用于本文件。
2015
化妆品安全技术规范（版）
4.检测原理
受试样品配置成溶液孵育鱼胚至24h，在体式显微镜下观察并记录（拍照
和视频）鱼胚的摆动次数、鱼胚死亡（凝结）数量。
5.实验材料与试剂
5.1.材料
5.1.1.斑马鱼交配盒
5.1.2.鱼胚收集器
5.1.3.细胞培养板：6孔细胞培养板
5.2.试剂
5.2.1.十二烷基硫酸钠（SDS）标准储备溶液（5mg/mL）：称取十二烷基硫酸
钠（SDS）标准品50mg（精确至0.01mg），用斑马鱼系统养殖水溶解
并定容至10mL容量瓶，于4℃保存。
5.2.2.十二烷基硫酸钠（SDS）标准储备溶液（1mg/mL）：称取十二烷基硫酸
钠（SDS）标准品10mg（精确至0.01mg），用斑马鱼系统养殖水溶解
并定容至10mL容量瓶，于4℃保存。
5.2.3.十二烷基硫酸钠（SDS）标准储备溶液（0.1mg/mL）：称取十二烷基硫
酸钠（SDS）标准品1mg（精确至0.01mg），用斑马鱼系统养殖水溶解
并定容至10mL容量瓶，于4℃保存。
6.实验仪器与设备
6.1.斑马鱼养殖系统
6.2.连续变倍体式显微镜（带拍照功能）
6.3.恒温培养箱
6.4.天平：精密度0.00001g
6.5.软件：SPSS统计分析软件
7.实验步骤
7.1.实验准备
7.1.1.鱼胚品系：野生型AB系斑马鱼自然交配的胚胎；
7.1.2.鱼胚要求：以斑马鱼开始交配受精为0hpf，选用46~56hpf健康、无畸
形、正常发育的鱼胚用于实验；
7.1.2.1.胚胎刺激反应的表现形式为：刺激摆动，死亡（凝结）等。
7.1.3.鱼胚孵育温度：28±1℃；
7.2.样品处理
7.2.1.水溶性样品：使用斑马鱼系统养殖水将受试样品稀释成0.01、0.1、1、
10、100%实验浓度，混匀，放置4℃保存备用。
7.3.对照组溶液
7.3.1.空白对照组：斑马鱼系统养殖水
7.3.2.阳性对照组：十二烷基硫酸钠（SDS）标准储备溶液（5、1
和0.1mg/mL）
7.4.实验方法
随机挑选46~56hpf健康、无畸形、正常发育的鱼胚用于