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文件名称:生物组织中还原糖等的鉴定.pptx
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总页数:7 页
更新时间:2025-06-27
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文档摘要

生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定

实验用品

1、仪器/器具:显微镜,水浴锅,电子天平,载玻片,盖玻片,试管,试管夹,试管架,双面刀片,镊子,滴管,研钵,研杵,吸水纸。

2、材料:苹果、花生种子、鸡蛋,马铃薯。

3、试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液+乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液)、苏丹Ⅲ染液、双缩脲试剂(A液:0.1g/mL的NaOH溶液+B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)、碘液、体积分数为50%的酒精溶液、蒸馏水。

一、还原糖的鉴定

1.将苹果去皮、切块,取5g放入研钵,加5mL水研磨,用单层纱布进行过滤。

2.取样液2mL加入试管中;

3.向试管中加入2mL新制的斐林试剂,震荡摇匀,观察溶液颜色;

4.将试管放在水浴锅中(50~65°C)加热约2分钟,观察溶液颜色的变化。

二、脂肪的鉴定

1.切片:花生种子浸泡、去皮、将子叶切成薄片,取最薄的薄片,放在载玻片中央;

2.染色:在子叶薄片上滴2~3滴苏丹III染液,染色3分钟,用吸水纸吸去周围染液;

3.去浮色:加1~2滴体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色,再用吸水纸吸去多余的酒精溶液;

4.制成临时装片:在薄片上滴1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片;

5.观察:低倍镜下寻找已着色颗粒,移至视野中心,换用高倍镜观察,观察被染色的脂肪组织颜色变化。

三、蛋白质的鉴定

1.将新鲜鸡蛋用镊子轻轻敲碎蛋壳,用滴管吸取0.5mL蛋清加入到试管中,取5mL蒸馏水将蛋清稀释,用滴管吹打均匀;

2.取2mL蛋清稀释液于试管中,向试管中加入双缩脲试剂A液1mL,摇匀;接着向试管中滴加B液3~4滴,摇匀,观察试管中颜色变化情况。

注意:先加A液再加B液。

实验结果和原理

还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀

脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色or脂肪+苏丹Ⅳ→红色

蛋白质+双缩脲试剂→紫色

因此,可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应,检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。

头脑风暴

1、哪种试剂使用时现用现配?

斐林试剂

2、脂肪鉴定实验中用什么洗去浮色?

50%酒精

3、在蛋白质的鉴定中为什么要先加A液?

营造碱性环境

4、哪一种试剂检测蛋白质?

双缩脲试剂