美国灵芝新资源的开发和利用
食品科学与工程
袁浩
2001360131一、目的和意义灵芝（Canodermalucidum）是一种名贵中药，现代医学科学研究证明，灵芝具有抗肿瘤、抗病毒、调整血糖血脂血压、提高免疫力等作用。因此，灵芝已被广泛用于治疗或辅助治疗多种疾病。近年来，灵芝的开发利用越来越受到人们的重视，消费量增长很快，种植面积不断扩大。但由于传统灵芝的栽培产量低，成本高、质量不稳定、产品档次低等现象，严重影响了灵芝生产规模的进一步扩大。一、目的和意义 为了提高灵芝的产量和质量，不但要在原有物种基础上研究更好的培养方法，还需要寻找新的种质资源，培育新的灵芝品种。 本课题组的指导老师从美国采集了一种灵芝新种质资源，针对该灵芝新种质资源的生物学特性做进一步的研究，以期获得高产、优质、抗逆性强、药用活性成分含量高的灵芝新品种直接应用于生产，或利用该种质的某一优良性状做为杂交育种的亲本加以利用。二、实验方法 本实验分为两大部分： 1、培养 实验选取四个品种的灵芝，分别是美国灵芝、赤芝、紫芝、黑芝；选取四种培养基，分别是玉米芯、木屑、稻草、棉子壳；和四个温度，16℃、21℃、26℃、31℃，进行正交培养实验，观察记录全过程，计算总结出最适合美国灵芝生长的培养基和温度；然后进行追加实验，得到在理想因素下的美国灵芝子实体。二、实验方法 2、有效成分分析 由于在培养过程中，发现美国灵芝的生长情况最佳，因此选取正交实验中生长情况第二理想的品种——赤芝，进行有效成分分析比较。对两种灵芝子实体的水分、灰分、蛋白质、多糖、氨基酸进行测定比较。其中，蛋白质测定采用凯氏定氮法；多糖测定采用苯酚－硫酸法；氨基酸测定交由华农检测中心测定。三、结果与分析1、正交实验培养基、菌种、温度三个因素的四个平均速度点示意图1、正交实验 结果分析： （1）培养基因素：本实验所选取的木屑培养基未能符合灵芝生长需要，使各品种灵芝均生长迟缓、菌丝稀疏、原基不能形成；稻草培养基为试验性选用的培养基，配合辅料的帮助，各品种灵芝的菌丝均正常生长；棉子壳培养基上各品种灵芝生长高速稳定，菌丝粗壮雪白。 （2）温度因素：低温对灵芝菌丝的生长抑制，在16℃下各品种生长缓慢、原基未能形成；普遍生长良好的温度范围在26－31℃，原基正常形成。 （3）菌种因素：美国灵芝与赤芝表现最突出。三、结果与分析1、正交实验 菌丝生长情况图三、结果与分析2、子实体 部分子实体生长情况三、结果与分析原基形成天数（d）子实体成熟天数（d）美国灵芝1D－28①19311D－28②1931赤芝2D－2619312A－2122332C－311940黑芝3D－212940紫芝4A－312231三、结果与分析2、子实体 部分子实体生长情况图三、结果与分析2、子实体 结果分析： 培养基因素（1）玉米芯培养基，糖类等营养成分最高，普遍菌种在玉米芯中的子实体生长情况良好，而且子实体较大；（2）木屑培养基，由于选择树种不适当，导致在菌丝生长期间及子实体生长期间均不理想，部分生长停止；（3）稻草培养基，菌丝生长期间速度及浓密度均高，但子实体生长未能如菌丝生长迅速，出现缓慢或停止，原基变硬、子实体畸形等现象，成熟的子实体菌盖不大；（4）棉子壳培养基，四个培养基中最稳定的一个，子实体生长稳定，形成菌盖较大。2、子实体 结果分析： 菌种因素（1）美国灵芝，在棉子壳培养基中生长最稳定，菌盖最大，橙红色，弹射少量孢子；在玉米芯培养基中表现次之；（2）赤芝，在玉米芯、稻草、棉子壳培养基中均能长成子实体，在玉米芯中子实体最大，棉子壳次之；菌盖在生长第二十日左右时颜色开始变红褐，随着变色程度加大，菌盖产生一层红褐色孢子，并弹射大量孢子；（3）黑芝，早期生长稳定，但中期受到霉菌感染；（4）紫芝，在棉子壳及玉米芯培养基中生长稳定，菌盖较大，颜色褐黑，表面有光泽，弹射少量孢子。三、结果与分析3、追加实验 追加实验条件确定： 通过正交实验分析，最佳组合为1D－26（美国灵芝、棉子壳、26℃），但在正交设计实验中并不包含，所以进行追加实验，接种6瓶1D－26。 结果分析： 在第22天时几乎同时满瓶，原基也同时形成，证明此追加实验的温度、菌种、培养基三因素的组合最为理想，为进一步对其有效成分分析奠定基础。三、结果与分析温度培养基菌种满瓶天数原基形成天数1D－2626棉子壳美国灵芝22193、追加实验 追加实验美国灵芝成熟子实体图三、结果与分析4、有效成分分析 （1）灰