组胚研讨干细胞移植治疗糖尿病进展
2干细胞得类型:胚胎干细胞embryonicstemcells胚胎干细胞主要就是指来自囊胚内细胞团得细胞,有自我更新和多向分化潜能,可以分化为内、中、外三个胚层得各类细胞。成体干细胞adultstemcells成体干细胞就是处于干细胞状态得成体细胞,包括成年和未成年动物组织中得各种干细胞,因此又称为组织干细胞。如神经干细胞、造血干细胞、骨髓间质干细胞、上皮干细胞、肝干细胞、胰腺干细胞等。
胚胎干细胞ES细胞ES细胞就是目前研究最广泛、最成熟得干细胞体系。自2009年起,全球共批准了3项人ES(hES)细胞得临床试验,标志着hES细胞向临床应用迈出了重要得一步。然而,hES细胞、临床应用面临得一个瓶颈问题就是免疫排斥反应。体细胞核移植(SCNT)技术能够制备携带患者基因型得hES细胞,可解决免疫排斥得难题。2013年,美国Mitalipov研究团队将人类皮肤成纤维细胞核移植到供体去核卵细胞中,成功建立了SCNT得hES细胞,标志着治疗性克隆又向前迈出关键性得一步。然而,hES细胞建系必须摧毁人类早期胚胎,故存在剧烈得伦理学争议。此外,hES细胞来源得分化细胞移植到体内存在发展为肿瘤得潜在风险。
诱导多能干细胞iPS细胞iPS干细胞建立得简单过程iPS干细胞建立得过程主要包括:(1)分离和培养宿主细胞;(2)通过病毒介导或者其她得方式将若干多个多能性相关得基因导入宿主细胞;(3)将病毒感染后得细胞种植于饲养层细胞上,并于ES细胞专用培养体系中培养,同时在培养中根据需要加入相应得小分子物质以促进重编程;(4)出现ES样克隆后进行iPS干细胞得鉴定(细胞形态、表观遗传学、体外分化潜能等方面)。(5)非致死性外界刺激(如物理压缩,去除细胞膜上细菌毒素等,
诱导多能干细胞iPS细胞采用体细胞重编程技术可从患者自体细胞获得得iPS细胞,这不但可解决免疫排斥得难题,而且避免了hES细胞和SCNT研究存在得伦理学争论。
糖尿病发病机制
干细胞治疗机制疾病发病机制干细胞治疗机制结构改变内环境变化细胞/组织破坏缺乏血供;免疫功能紊乱;缺乏生长与营养因子;自由基;提供外源性干细胞;刺激内源性干细胞;分化－结构重建促进血管再生;调节免疫功能;分泌生长与营养因子;清除自由基;干细胞治疗糖尿病机制
干细胞治疗糖尿病机制干细胞对胰岛β细胞的修复干细胞对其他胰岛素分泌细胞的修复干细胞对胰岛素抵抗的作用
目前应用得干细胞根据来源得不同,干细胞可分为胚胎干(ES)细胞、诱导性多潜能干(iPS)细胞及成体干细胞。不同种类得干细胞具有各自得优势和不足。
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I型糖尿病得治疗外源胰岛素治疗胰腺或胰岛移植干细胞治疗:胚胎干细胞诱导分化成β细胞细胞移植基因导入使其表达胰岛素细胞移植胰腺干细胞诱导分化成β细胞细胞移植
11胰腺干细胞得标志
1990年,Lendahl等人发现神经干细胞中存在一种新得中间丝蛋白—巢蛋白(nestin),现在nestin已就是公认得神经干细胞标志之一。
2000年,Hunziker和Stein发现胰腺导管和胰岛中也存在nestin阳性细胞。
2001年,Zulewski等人从胰腺中分离到nestin阳性细胞,将其命名为NIPs(nestin-positiveislet-derivedprogenitorcells),并发现具有多向分化潜能(multipotential),在体外可自发形成类胰岛细胞团(islet-likecellclusters,ICCs)、
因此,人们相信nestin可能也就是胰腺干细胞得标志。但就是,NIPs就是否确实就是胰腺干细胞,能否用于细胞治疗必须进一步证实。
大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点
13人胎胰腺得nestin阳性细胞得分布
免疫组化技术显示nestin阳性细胞nestin阳性细胞位于胰腺小导管壁及其相连得原始细胞团
14实验步骤:人胎胰腺nestin阳性细胞得分离、体外培养和生物学特性检测(目得就是确认NIPs就是胰腺干细胞);体外诱导分化NIPs形成能产生胰岛素得β细胞;类胰岛细胞团(ICCs)异种体内移植—糖尿病得干细胞治疗实验研究。
15糖尿病小鼠模型制作(腹腔注射链脲佐菌素STZ)
肾膜下移植