本过程利用了免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合，这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体。*第93页，共136页，星期日，2025年，2月5日细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活有无限增殖能力（失去凋亡机制，失去接触抑制等）的细胞是肿瘤细胞，而具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞。*第94页，共136页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体的应用①在基础理论研究中具有重要意义②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有特异性高、灵敏度高等优越性。③生物导弹（作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤）*第95页，共136页，星期日，2025年，2月5日目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。资料*第96页，共136页，星期日，2025年，2月5日三.植物细胞杂交（细胞融合）1960年英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶，成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体,开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞杂交的主要过程：1.原生质体的制备。2.原生质体的融合。3.杂合体的鉴别与筛选。*第61页，共136页，星期日，2025年，2月5日植物A细胞植物B细胞去壁原生质体A原生质体B原生质体融合融合体再生壁杂种细胞细胞分裂愈伤组织杂种植株去壁的常用方法：酶解法（纤维素酶、果胶酶等）原生质体融合方法：物理法：离心、振动、电刺激等化学法：聚乙二醇（PEG）植物体细胞杂交过程*第62页，共136页，星期日，2025年，2月5日(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交过程示意图*第63页，共136页，星期日，2025年，2月5日白菜甘蓝白菜－甘蓝植物体细胞杂交应用*第64页，共136页，星期日，2025年，2月5日第三节动物细胞工程动物细胞工程是由多个学科综合组成的新兴技术。相关学科：基础生物学、生物化学、遗传学、免疫学、分子生物学、微生物学、化学工程学、应用物理、电子计算机等*第65页，共136页，星期日，2025年，2月5日动物细胞工程的应用：生产基因工程药物、单克隆抗体、疫苗等。主要特点：以工业化为目的，应用动物细胞培养的基本原理，研究生物活细胞为主体的生物反应过程，解决动物细胞培养过程中带有共性和特性的工程技术问题。*第66页，共136页，星期日，2025年，2月5日动物细胞工程通常采用的技术手段动物细胞融合所采用技术的理论基础动物细胞培养单克隆抗体胚胎移植核移植细胞增殖全息胚学说*第67页，共136页，星期日，2025年，2月5日培养条件：适宜的温度、pH、溶解氧水平动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础*第68页，共136页，星期日，2025年，2月5日（1）原代培养：以动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织为材料，先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞，然后配制成一定浓度的细胞悬浮液，放入培养瓶中，在培养箱中培养。（2）传代培养：随着细胞的生长和增殖，培养瓶中的细胞越来越多，需要定期地用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中培养。一、动物细胞培养*第69页，共136页，星期日，2025年，2月5日动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系单个细胞加培养液*第70页，共136页，星期日，2025年，2月5日动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液细胞株细胞系细胞增殖无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体*第71页，共136页，星期日，2025年，2月5日细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系注意界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变*第72页，共136页，星期日，2025年，2月5日动物细