真核生物mRNA转录后加工从DNA转录而得到的RNA并不能执行mRNA的功能,而是hnRNA(核内不均一RNA)。需要加帽需要加尾polyA需要切除内含子。第62页,共101页,星期日,2025年,2月5日蛋白质的合成需要的因子核糖体、mRNA、tRNA、氨酰tRNA合成酶、辅助蛋白因子(起始因子、延伸因子、释放因子)需要的能量主要供给者是GTP,而不是ATP。第63页,共101页,星期日,2025年,2月5日氨酰tRNA合成酶该酶催化tRNA和其相应的氨基酸结合。为了正确合成蛋白质,tRNA必须与其相应的蛋白质正确连接。第64页,共101页,星期日,2025年,2月5日遗传密码——三联体密码第65页,共101页,星期日,2025年,2月5日密码子的性质密码子不重叠密码子的通用性有通用就有特殊!线粒体中:UAG不是终止密码子,而是Trp的密码子;AUA不是Ile的密码子,而是Met的密码子;AGA、AGG不是Arg的密码子,而是终止密码子。密码子的简并性除了色氨酸和甲硫氨酸各有一个对应的密码子外,其它的氨基酸均具有两个以上密码子。亮氨酸、精氨酸、丝氨酸最多,达到6个。密码的连续性摆动性一个氨基酸有可能有若干个密码子,但是携带同一种氨基酸的tRNA只有一种反密码子,这样导致tRNA与mRNA的配对必然有可能不严格。发现密码子第三位是配对不严格的。第66页,共101页,星期日,2025年,2月5日蛋白质合成机制方向:从氨基端向羧基端延伸。密码子识别:仅仅是tRNA的作用而不是tRNA上氨基酸的作用。步骤蛋白质合成起始肽链延伸肽链合成的终止第67页,共101页,星期日,2025年,2月5日蛋白质合成的起始起始密码子AUGSD序列第68页,共101页,星期日,2025年,2月5日肽链的延伸结合(GTP供能)转肽(无GTP或者ATP参与)移位(移位酶,GTP供能)第69页,共101页,星期日,2025年,2月5日肽链合成的终止遇到终止密码子为何终止?第70页,共101页,星期日,2025年,2月5日翻译后的修饰作用肽链末端修饰肽链的共价修饰内质网中。肽链的水解修饰如促黑素促皮质激素元经过水解后产生多个活性肽,β-内啡肽、β-促黑激素、γ-促黑激素、促肾上腺皮质激素、β-脂肪酸释放激素。第71页,共101页,星期日,2025年,2月5日蛋白质的理化性质两性解离与等电点与氨基酸相同,蛋白质也是两性的。蛋白质处于等电点时,其电导率、渗透压、粘度、溶解度等性质均达到最低值。等电点不唯一,等离子点唯一。第30页,共101页,星期日,2025年,2月5日蛋白质的理化性质胶体性质及蛋白质的沉淀蛋白质为何稳定?水化膜和电荷排斥作用。破坏以上两项稳定因素就导致蛋白质的沉淀。在等电点时:蛋白质净电荷为零。加入脱水剂:蛋白质失去水化膜。第31页,共101页,星期日,2025年,2月5日蛋白质的变性作用当天然蛋白质受到某些物理化学因素后,有氢键、盐键等次级键维持的高级结构遭到破坏,导致其生物学性质、理化性质发生改变。特征:溶解度降低、粘度增大、分子扩散速度减慢、渗透压降低。因素:加热、紫外线、X-射线、超声波。第32页,共101页,星期日,2025年,2月5日蛋白质的光吸收280nmDNA:260nm第33页,共101页,星期日,2025年,2月5日蛋白质的分离和纯化透析密度梯度离心层析分子筛层析离子交换层析亲和层析吸附层析(活性炭等)电泳第34页,共101页,星期日,2025年,2月5日核酸以核苷酸为基本单位。碱基、戊糖和磷酸胞嘧啶脱氧核苷酸第35页,共101页,星期日,2025年,2月5日RNA细胞质RNAmRNA(5%)、tRNA(15%)、rRNA(80%)rRNA:原核:70S(30S+50S)真核:80S(40S+60S)细胞核RNA第36页,共101页,星期日,2025年,2月5日RNA结构一级结构二级结构三级结构第37页,共101页,星期日,2025年,2月5日tRNA的二级结构——三叶草氨基酸接受区3‘端的CCA,A为核苷,接受氨基酸。反密码区二氢尿嘧啶区TC区可变区五臂四环第38页,共101页,星期日,2025年,2月5日tRNA三级结构——“L”形第39页,共101页,星期日,2025年,2月5日DNA结构一级结构(如何测定?)二级结构(多态性)三级