第1页，共24页，星期日，2025年，2月5日20世纪中期，普遍采用一些经典的分离方法如沉淀、蒸馏和萃取等分离物质。现代分析中，大量采用色谱和电泳分离方法。迄今为止，色谱方法是最为有效的分离手段，其应用涉及每个学科领域。多种方法与色谱法联用，使色谱法成为生产和科研中解决各种复杂混合物分离分析的一种重要手段。§15-1色谱法概述第2页，共24页，星期日，2025年，2月5日1906年，俄国植物学家Tswett最先创立。他采用填充有固体CaCO3细粒子的玻璃柱，将植物色素的混合物加于柱顶端，然后以溶剂淋洗，被分离的组分在柱中显示了不同的色带，他称之为色谱。20世纪50年代，色谱发展最快（一些新型色谱技术的发展；复杂组分分析发展的要求）。1937年-1972年，15年中有12个Nobel奖是有关色谱研究的。一、色谱法简介第3页，共24页，星期日，2025年，2月5日(1）粗叶绿素+石油醚（2）石油醚流动相相对运动固定相（吸附剂）CaCO3色谱柱胡萝卜素利用不同物质在流动相叶黄素与固定相作用时的行为叶绿素差异得到分离(吸附)（3）小刀割开，用醇溶出?（吸附作用）第4页，共24页，星期日，2025年，2月5日1931年奥地利化学家库恩胡萝卜素植物色素分离20世纪30年代离子交换色谱建立1940年吸附色谱与电泳相结合1941年分配色谱创立1952年气相色谱法建立1968年高效液相色谱法建立1975年之后离子色谱、超临界流体色谱、高效毛细管电泳、场流动分级分离第5页，共24页，星期日，2025年，2月5日Tiselius,A.W.K.Martin,A.J.P.Synge,R.L.M.1948年Nobel化学奖1952年Nobel化学奖吸附色谱与电泳分配色谱第6页，共24页，星期日，2025年，2月5日使用外力使含有样品的流动相（气体、液体或超临界流体）通过一固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。样品中各组份在两相中进行不同程度的作用。与固定相作用强的组份随流动相流出的速度慢，反之，与固定相作用弱的组份随流动相流出的速度快。由于流出速度的差异，使得混合组份最终形成各个单组份的“带”或“区”，对依次流出的各个单组份物质可分别进行定性、定量分析。色谱分离基本原理第7页，共24页，星期日，2025年，2月5日利用不同物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数，当两相作相对移动时，使这些物质在两相间进行反复多次分配，原来微小的分配差异产生了很明显的分离效果，按先后顺序流出色谱柱。通过适当的检测手段，可以对分离后的各组分进行测定。固定相，流动相，色谱柱。色谱法的实质第8页，共24页，星期日，2025年，2月5日1.按两相物理状态分：气相色谱（GC）：流动相为气体。气固色谱（GSC）和气液色谱（GLC）。液相色谱（LC）：流动相为液体。液固色谱（LSC）和液液色谱（LLC）。超临界流体色谱（SFC）：流动相是超临界流体。二、色谱法分类第9页，共24页，星期日，2025年，2月5日2.按固定相的固定方式分：柱色谱（CC）：有两类：填充柱色谱和毛细管色谱。纸色谱（PC）：以多孔滤纸为载体，吸附在滤纸上的水为固定相。薄层色谱（TLC）：以涂渍在玻璃板或塑料板上的吸附剂薄层为固定相。薄层色谱和纸色谱属于平板色谱。第10页，共24页，星期日，2025年，2月5日3.按分离机理分：吸附色谱：不同组分在固定相的吸附作用不同。分配色谱：不同组分在两相间的分配系数不同。离子交换色谱：不同组分在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同。凝胶色谱（尺寸排阻色谱）：不同尺寸的分子在固定相上的渗透作用不同。第11页，共24页，星期日，2025年，2月5日1.分离效