任务1显微镜和显微技术李宝玉副教授开始学习广东农工商职业技术学院
任务描述1任务1:某微生物实验室要定期对显微镜进行维护和保养,请你们协助技术员完成此项任务。2任务2:如何利用显微镜细菌、酵母菌和霉菌的形态3任务3:油镜的原理及使用方法
思考题决定显微观察效果的二个重要的因素?如何判断目镜、物镜放大倍数的大小?物镜10/0.25(40/0.65)、160/0.17分别是什么参数?为什么在用高倍镜和油镜观察标本之前要先用低倍镜进行观察?不同放大倍数的物镜,其工作距离有什么不同?有什么规律?油镜与普通物镜在使用方法上用什么不同?应注意什么?为什么加香柏油?物镜同焦?有什么实际意义?
目录CONTENTS1普通光学显微镜结构2普通光学显微镜使用和观察3观察后的处理工作
01普通光学显微镜结构
普通光学显微镜结构目镜物镜聚光器虹彩光圈光源镜筒镜臂载物台粗调焦螺旋微调焦螺旋镜座物镜转换器光学系统机械装置
普通光学显微镜结构物镜是显微镜最重要的光学部件物镜干燥系物镜低倍物镜:4X、10X和20X;高倍物镜:40X和45X。透镜与盖玻片之间以空气为介质。油浸系物镜放大率为60X、95X、100X油镜。外壳上常标刻有“Oil”字样。以油为介质。
普通光学显微镜结构物镜性能取决于物镜的数值孔径,标于物镜的外壳上此外还刻有镜筒长度及所要求盖玻片厚度等主要参数。
普通光学显微镜结构目镜把物镜放大的实象(中间象)再放大一次,并把物象映入观察者的眼中,实质上目镜就是一个放大镜。目镜上常标有5X、10X、16X等放大倍数。
普通光学显微镜结构目镜与物镜的比较放大倍数镜头长度透镜大小10x长大12.5x短小放大倍数透镜
普通光学显微镜结构目镜与物镜的比较放大倍数镜头长度透镜大小10x短大40x长小S40/10:放大倍数0.65/0.25:镜口率160:镜筒直径0.17:盖玻片厚度
普通光学显微镜结构聚光镜弥补光量的不足和适当改变从光源射来的光线性质,将光线聚焦于被检物体上,以得到最强的照明光线。用低倍镜时聚光器应下降,油镜时升至最高。虹彩光圈可放大或缩小以调节光强。
02普通光学显微镜的使用与观察
普通光学显微镜的使用与观察打开显微镜箱,一手握镜臂,一手托镜座,将显微镜取出。取镜和安放
普通光学显微镜的使用与观察把显微镜放在实验台的前方稍偏左。接电源将显微镜接到电源插座上。保持显微镜直立、平稳。取镜和安放放距实验台边缘5厘米处,略偏左一拳左右
普通光学显微镜的使用与观察物镜调至最低倍转动转换器,使低倍物镜对准通光孔注意不要用手扳物镜!取镜和安放
普通光学显微镜的使用与观察载物台调至最高的位置取镜和安放
普通光学显微镜的使用与观察打开光源开关,使用滑动变阻器,调节光线强度或者:调整反光镜和光圈以获得最适当的光线取镜和安放视野光圈反光镜
普通光学显微镜的使用与观察将载物台下降至最低;将要观察标本放在载物台上并用玻片夹固定,移动装片使要观察的物体对准通光孔;再将载物台升至最高。固定装片
普通光学显微镜的使用与观察固定装片
普通光学显微镜的使用与观察调瞳距将双目镜筒用双手拿住,边往里外伸缩,边用双眼观察视野标本,使两个视野合并到一个圆视野为止。
普通光学显微镜的使用与观察粗调松紧调节旋钮
普通光学显微镜的使用与观察调焦向外转动粗准焦螺旋使载物台下降至看到较清晰的影像转动细准焦螺旋至标本影像最清晰
普通光学显微镜的使用与观察调焦把要用高倍镜观察的对象移动到视野的中央
普通光学显微镜的使用与观察转换高倍镜转动转换器更換高倍的40X物镜使用滑动变阻器调节光线强度或者调整光圈或反光镜以取得适当的光线再转动细准焦螺旋至标本影像清晰为止
普通光学显微镜的使用与观察油倍镜的观察:油镜:60X—100X的物镜使用时提升镜筒(降载物台),将物镜转离光轴,在盖玻片滴一滴香柏油,换上油镜,小心调节粗准焦螺旋,使油镜慢慢地下降(或载物台上升),从侧面仔细观察油镜下端与标本之间距离,当油镜的下端开始触及油滴时即停止移动。从目镜观察,调节细准焦螺旋,直至看清标本物像
普通光学显微镜的使用与观察染色结果枯草芽胞杆菌革兰氏染色结果
普通光学显微镜的使用与观察染色结果大肠杆菌革兰氏染色结果
普通光学显微镜的使用与观察在显微镜的光学系统中,物镜的性能最为关键,它直接影响着显微镜的分辨率。而在普通光学显微镜配置的几种物镜中,油镜的放大倍数最大,对微生物学研究最为重要。与其他物镜相比,油镜的使用比较特殊,需在载玻片和镜头之间加滴镜油,这主要又有如下两方面的原因:
普通光学显微镜的使用与观察1、增加照明亮度油镜的放大倍数可达100×,放大倍数这样大的镜头,焦距很短,直径很小,但所需要的光照强度却最大使用油镜时需在油镜和玻片之间加入与玻璃的折射率(n=1.55)相仿的镜油(通常使用香柏