4、植物细胞杂交1960年英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶，成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体,开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞杂交的主要过程如下：(1)原生质体的制备：机械法与酶法(2)原生质体的融合：物理方法与化学法；膜融合与核融合二、不同对象的细胞工程(3)杂合体的鉴别与筛选：显微镜、互补法、细胞与分子生物学法注：原生质体培养过程：脱去细胞壁的原生质体→细胞壁再生→细胞分裂形成细胞团→愈伤组织→分化形成芽和根→完整植株二、不同对象的细胞工程细胞育种诱导突变，筛选新品系、新品种次生代谢产物生成从培养的植物细胞中提取所需的代谢产物。优点?比栽培原料作物更易控制最佳生产条件；?培养物为无菌、无虫材料，能保证产品质量；?工艺操作较为简单，可减少劳动费用，提高生产率。5、植物细胞工程的应用二、不同对象的细胞工程（三）动物细胞工程1、定义:p1572、动物组织培养：是指将取自动物的某类组织，在体外培养并一直保持原本已分化的特性，该组织的结构与功能持续不发生明显变化。3、细胞培养：是指离体细胞在无菌培养条件下的分裂、生长。在整个培养过程中细胞不出现分化，不再形成组织。可分悬浮型和贴附型。4、动物细胞杂交（1）融合方法：病毒诱导融合、化学诱导融合、电激诱导融合二、不同对象的细胞工程（2）筛选形成五种类型的细胞：异型融合细胞（双核、多核）、两种同型融合细胞（双核、多核）、未发生融合的两种亲本细胞。筛选原理：后四种不成活，多核融合细胞因核分裂受阻而死亡。a、HAT选择系统二、不同对象的细胞工程b、抗药性选择系统c、营养缺陷型选择系统5、克隆（1）定义：两种说法，克隆是指离体条件下的无性繁殖。（2）克隆“多莉”二、不同对象的细胞工程**第四章细胞工程教学重点、难点、学时一、概述二、不同对象的细胞工程（一）微生物细胞工程（二）植物细胞工程（三）动物细胞工程三、细胞工程在环境方面的应用1、要点细胞工程基础知识、微生物细胞工程、植物细胞工程、动物细胞工程、利用细胞融合技术构建环境工程菌、抗污染型植物2、重点细胞工程的定义、微生物细胞融合、植物组织培养、植物原生质体制备、培养和融合、动物细胞融合、单克隆抗体的制备、细胞拆合3、学时5学时教学要点、重点、学时一、概述（一）细胞工程相关名词1、细胞是生物体的基本结构单位和功能单位，单细胞生物，一个细胞就是一个个体，而多细胞生物则由许多细胞成一个个体。2、细胞工程：是指在细胞水平上的遗传操作，即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的技术。?3、细胞融合：是用自然或人工的方法使两个或几个不同细胞融合的为一个细胞（含有原来两个细胞的染色体）的过程。4、细胞亚结构移植是指将细胞的亚结构（如细胞核、染色体等）移植到另一个细胞中，从而改变细胞的遗传性状。主要有细胞拆合、染色体工程和染色体组工程。5、细胞拆合：即细胞换核技术。是通过物理或化学方法将细胞质与细胞核分开，再进行不同细胞间核质的重新组合，重建成新细胞。6、染色体工程:染色体工程是按人们需要来添加或削减一种生物的染色体，或用别的生物的染色体来替换。7、染色体组工程:染色体组工程是整个改变染色体组数的技术。自从1937年秋水仙素用于生物学后，多倍体的工作得到了迅速发展，例如得到四倍体小麦，八倍体小黑麦等。三倍体西瓜是无籽西瓜，但没有后代。一、概述8、杂交瘤细胞：现代免疫学早已查明，一种抗体是由一种B淋巴细胞产生的，人体内约有一亿种不同的B淋巴细胞，可产生一亿种不同的抗体。依据这种事实，1975年，著名免疫学家米尔斯坦和同事勒尔在英国剑桥大学分子实验室内巧妙地把B淋巴细胞和能无限生长的骨髓细胞合并成一个杂交瘤细胞。杂交瘤细胞因而具备了双重特性：既能无限生长，又能产生B淋巴细胞的抗体。9、单克隆抗体：被人们誉为对付癌症的“生物导弹”。如果能选出一个制造一种专一抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成一种决定簇的抗体，称为单克隆抗体。一、概述10、干细胞是一种具有多项分化潜能和自我复制能力的原始未分化细胞，是形成哺乳类各种组织器官的祖宗细胞。根据来源和个体发育过程中先后次序不同，干细胞