摘要
红托竹荪(Dictyophorarubrovolvata)是一类珍贵的食用菌,以其独特的口
感和丰富的营养成分而备受喜爱。作为一类价格高昂的食用菌,红托竹荪全株由
菌盖、菌柄及菌托组成,目前可食用部分仅仅为菌柄,而占鲜重一半的竹荪菌盖
以及竹荪菌托则作为废弃物处理,造成巨大资源浪费。竹荪活性物质的研究大部
分集中在竹荪可食用部分上,而其他部位的研究较少,尤其是竹荪菌托废弃物的
研究鲜有报道。本课题以红托竹荪菌托胶质为主要研究材料,对具有较高多糖含
量及较好生物活性的红托竹荪菌托胶质的制备方法进行了研究,并对其应用于护
肤类化妆品的潜在价值进行探究,以期为红托竹荪废弃物的开发利用提供理论依
据。主要的研究内容及结论如下:
1、对红托竹荪不同部位的粗多糖理化特征及活性进行了系统比较研究。对
比了红托竹荪菌柄粗多糖(DIP)、菌盖粗多糖(DPP)、菌托胶质粗多糖(DGP)的
功效成分、结构特征、流变学行为,体外抗氧化特性以及UVB光保护作用。结
果表明DIP拥有最高的多糖含量(58.64%)、DGP拥有最高的葡萄糖醛酸含量
(38.01%),在DIP和DPP中葡萄糖为主要的单糖组成,而葡萄糖醛酸是构成DGP
的主要单糖。DGP的分子量远小于DIP与DPP,为51.19kDa,是一类小分子的
酸性多糖。红托竹荪不同部位粗多糖具有假塑性流体特征且弹性在它们的粘弹性
行为中占主导作用,DIP的表观粘度和假塑性程度都是最高,DGP能在外力作用
下最快恢复到原始状态。相对于DIP和DPP,DGP表现出更卓越的体外抗氧化
活性,能够有效清除DPPH和ABTS自由基。在光保护活性方面,它们均有修复
UVB诱导的人皮肤成纤维(HSF)细胞死亡,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢
酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性降低,丙二醛(MDA)及活性氧
(ROS)含量上升的光保护活性,其中DGP的活性最强。DGP具有的独特的性质
以及生物活性为红托竹荪废弃物菌托胶质的开发利用提供了依据。
2、对红托竹荪菌托胶质的制备工艺进行了探究。以多糖含量、体外抗氧化
活性以及保湿活性为指标,对红托竹荪菌托胶质在制备时原料前处理、加水比例、
打浆时间以及不同的富集工艺等因素进行研究优化。优化得到的红托竹荪菌托胶
质最佳的制备工艺是:打浆时不加连接膜,加水比例(v/v)为1:2,打浆时间
5min,不富集直接冻干组分(NT),超滤3K膜截留组分(3K),超滤1W膜截留
组分(1W),最佳制备工艺下得到的红托竹荪菌托胶质中多糖含量、体外抗氧化
能力以及保湿活性均较高,其中NT的多糖含量最高(52.48%),3K的DPPH自
由基及ABTS自由基清除能力最强,1W的保湿活性最强。探究最佳制备工艺
下的红托竹荪菌托胶质的功效成分含量,发现它们均具有较高的葡萄糖醛酸含量
(36.61%-40.97%)。
3、对于最佳制备工艺条件下得到的红托竹荪菌托胶质的护肤功效进行了研
究,探究了红托竹荪菌托胶质对皮肤细胞损伤修复、抗炎、美白及光保护等方面
的功效。首先,红托竹荪菌托胶质具有细胞划痕损伤修复活性,暗示了红托竹荪
菌托胶质对皮肤损伤修复具有作用;同时,由于不处理直接冻干的红托竹荪菌托
胶质NT的划痕修复活性最好,重点对NT的活性进行了研究。800μg/mLNT对
巨噬细胞RAW264.7没有毒性作用,且以剂量依赖的方式抑制巨噬细胞
RAW264.7释放NO。NT处理能够显著抑制斑马鱼胚胎体表以及体内黑色素产
生,能够剂量依赖性地抑制斑马鱼体内地酪氨酸酶活性,且当浓度为800μg/mL
时,处理组斑马鱼的相对酶活抑制率好于曲酸处理组。同时NT能修复因UVB
损伤而降低的细胞存活率,且能提高氧化应激酶SOD、CAT及GSH-Px的活性,
降低因UVB照射而上升的MDA与ROS含量,对HSF细胞因为光损伤而产生
的氧化应激有保护作用,同时NT处理能够提高HSF细胞中的人Ⅰ型胶原蛋白及
人Ⅲ型胶原蛋白含量,减缓UVB诱导的加速老化。以上结果表明NT具有抗炎、
美白以及UVB光保护活性。
4、探究了DGP和NT对UVB光保护活性的机制。分别对空白对照组(编
号为C)、UVB诱导的模型组(编