4、两点固定时间法：指在时间-吸光度曲线上取尚在反应中的两点间的差值来计算结果，此两点既不是起始点也不是反应终点。
此法应选用酶反应的线性期进行测定，同时还应确定该法能测定酶活性的最高限度，对于超过此限的样品，应采用缩短反应时间或减少样品用量的办进行测定。
第31页，共50页，星期日，2025年，2月5日常见几种报警：
第32页，共50页，星期日，2025年，2月5日第33页，共50页，星期日，2025年，2月5日第34页，共50页，星期日，2025年，2月5日临床生化检验的校准与质控
第35页，共50页，星期日，2025年，2月5日常用的有Linear单点校准：需要设置一个标准品（浓度必须大于0），以原点和标准品的连线为校准曲线（横坐标为浓度C，纵坐标为吸光度A）。单点校准必须设置空白校准0点。Logistic-Log4P：标准品的数量至少为4个，其中第1个标准品的浓度为0，标准品的浓度必须从低到高的顺序排列。适用于随着浓度的增加需吸光度偏移的实验项目的标准曲线。Spline：此校准方式要求提供2~6个标准品，其中第1个标准品的浓度必须为0，标准品的浓度必须从低到高的顺序排列。计算方法：K因数法（1点线性法）-----由空白液的标准（C1）通过公式计算得出的K因数制成的曲线。K因数法测定C1（空白试剂）的吸光度时，先输入K值，再计算浓度值。公式：CX=K(AX-B)+C1第36页，共50页，星期日，2025年，2月5日第1页，共50页，星期日，2025年，2月5日生化分析技术基本原理：
第2页，共50页，星期日，2025年，2月5日1：反射分析技术原理：仪器内部光源发出一束光透过透明支持层，在试剂层光被有色化合物部分吸收后，在扩散层提供的反射面被反射，反射光经滤光装置后回到光度检测器被读数。光密度由此被转化为电压读数，并计算成分析物浓度。2．散射免疫比浊法技术原理：是指一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液使遇到抗原抗体复合物粒子，光线被粒子颗粒折射，发生偏转，光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。散射光的强度与复合物的含量成正比。3.透射免疫比浊法的技术原理：是测定一定体积的溶液通过的光线量，当光线通过时，由于溶液中存在的抗原抗体复合物粒子对光线的反射和吸收，引起透射光的减少，测定的光通量和抗原抗体复合物的量成反比。第3页，共50页，星期日，2025年，2月5日化学发光技术基本原理：
1：电化学发光分析技术（ECL）：是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应。包括了两个过程，发光底物二价的三联吡啶钌及反应参与物三丙胺在电极表面失去电子而被氧化。氧化的三丙胺失去一个H成为强还原剂，将氧化型的三价钌还原成激发态的二价钌，随即释放光子恢复为基态的发光底物。（发光标记物-三联吡啶钌）代表仪器品牌----德国罗氏CobasE601第4页，共50页，星期日，2025年，2月5日第5页，共50页，星期日，2025年，2月5日2：化学发光标记免疫分析：化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CLIA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridiniumester(AE),是有效的发光标记底物,其通过起动发光试剂(NaOH2H2O2)作用而发光,强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光。吖啶酯作为标记物用于免疫分析,其化学反应简单、快速、无须催化剂;检测小分子抗原采用竞争法,大分子抗原则采用夹心法,非特异性结合少,本底低;与大分子的结合不会减小所产生的光量,从而增加灵敏度。代表仪器品牌----美国贝克曼DXC800第6页，共50页，星期日，2025年，2月5日DXC800照片第7页，共50页，星期日，2025年，2月5日3.干化学反射分析技术原理及优点：与普通生化仪比较，干化学被测物质的化学反应是在干燥的基质中进行，入射光通过基质被吸收后，检测反射光的减弱程度来反映被测物质浓度的大小。普通生化仪反应载体是水溶液，入射光被有色反应产物吸收后减弱，通过吸光度的大小来反映被测物质浓度的大小。干化学均用一次性消耗品，无交叉污染和携带污染。缺点是：成本比较高。第8页，共50页，星期日，2025年，2月5日第9页，共50页，星期日，2025年，2月5日4：生化仪恒温装置---自动生化分析仪通过温度控制系统保持温度的恒定，以保证反应的正常进行，可以对25℃、30℃、和37℃三种温度进行恒温。保持恒温的方式有三种：
空气干式浴恒温：在比色杯与加热器之间隔有空气。优点：方便，速度快，不需要特殊的保护。缺点：稳