*第30页，共63页，星期日，2025年，2月5日二、生化鉴别法1、酶法利用酶对底物特异性的催化活力，做为酶类生物制品简便、快速鉴别方法。如尿激酶的鉴别使纤维蛋白原溶解2、电泳法等电点聚焦电泳、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳等。可用于蛋白质类生物制品的鉴别。如重组人生长激素的鉴别：SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳*第31页，共63页，星期日，2025年，2月5日*第32页，共63页，星期日，2025年，2月5日*第33页，共63页，星期日，2025年，2月5日三、生物鉴别法（一）血清学法-体外抗原抗体试验抗原抗体类生物制品的鉴别抗原抗体在体外结合时，可因抗原物理性状不同或参与反应的成分不同而出现各种类型的反应，如凝集反应、沉淀反应、中和反应和补给结合反应，即经典血清学反应，在此基础上，又衍生出免疫扩散、免疫电泳、荧光标记、酶标记等高度敏感的检测技术。*第34页，共63页，星期日，2025年，2月5日（二）生物学法利用生物体对生物制品特定的生物活性的反应为基础进行供试品的鉴别来鉴别药物。例如:小鼠惊厥试验鉴别胰岛素肝素延长血凝鉴别肝素*第35页，共63页，星期日，2025年，2月5日第三节杂质检查可用来判断药品的优劣。由于生物制品来自生物体，生物活性特特异性强，制造与纯化工艺复杂，分子结构常常不确定，有时产品并非单一，极微量杂质可能产生显著的效应，因此，其杂质检查显得尤为重要。主要包括：一般杂质检查特殊杂质检查安全性检查*第36页，共63页，星期日，2025年，2月5日一般杂质检查氯化物、硫酸盐、磷酸盐、铵盐、铁盐、重金属、酸度、溶液的澄清度、溶液的颜色、水份及干燥失重、炽烧残渣*第37页，共63页，星期日，2025年，2月5日一、特殊杂质检查从原料中带入或生产工艺中或贮藏过程中引入的杂质根据生物制品的生产工艺特点与产品的稳定性，其特殊杂质分为：生物污染物：微生物污染、宿主细胞蛋白、外源性DNA、培养基成分等产品相关杂质：二聚体和多聚体、脱氨或氧化产物、突变物、裂解产物等工艺添加剂：残余抗生素、蛋白分离剂聚乙二醇、乙醇、佐剂氢氧化铝，产品稳定剂如辛酸钠、肝素，防腐剂苯酚、硫柳汞，细菌与病毒灭活剂甲醛、戊二醛等。*第38页，共63页，星期日，2025年，2月5日（一）宿主细胞蛋白残留量测定生物制品生产用细胞、工程菌相关的特殊杂质。方法：ELISA*第39页，共63页，星期日，2025年，2月5日（二）外源性DNA残留量的检查测定方法：分子杂交技术基于DNA结合蛋白分析系统实时定量PCR方法*第40页，共63页，星期日，2025年，2月5日（三）产品相关杂质检查
生物制品在生产制造、分离纯化和贮藏保存过程中产生的与产品结构类似的同系物、异构体、突变物、氧化物、聚合体或降解物。常用HPLC法和电泳法。如重组人生长激素中相关蛋白质的测定总相关蛋白质含量不超过10%。*第41页，共63页，星期日，2025年，2月5日（四）残余抗生素的检查如果生物制品在生产过程中使用了抗生素，则不仅要在纯化工艺中除去，而且要在原液检定中增加残余抗生素活性的检测方法。常用方法：抑菌圈测量。结果判定：对照溶液有抑菌圈，阴性对照无抑菌圈，供试品溶液抑菌圈的直径小于对照溶液抑菌圈的直径*第42页，共63页，星期日，2025年，2月5日二、安全性检查（一）热原检查法和细菌内毒素检查法（二）异常毒性检查（三）过敏试验检查异性蛋白（四）降压试验检查组胺、类组胺或其他导致血压下降的物质（五）无菌试验检查药品及敷料是否有活菌的一种方法*第43页，共63页，星期日，2025年，2月5日第四节含量（效价）测定（一）含量测定表示方法：百分含量：适用于结构明确的小分子药物或经水解变成小分子的药物测定方法：1、HPLC2、SDS（二）效价测定表示方法：生物效价或酶活力：适用于酶类或蛋白质类药物。*第44页，共63页，星期日，2025年，2月5日一、理化分析法（一）滴定分析法根据生物制品中某些成分能与标准溶液定量地发生酸碱中和反应、氧化还原反应等特性，通过滴定进行含量测定。如胰酶中胰脂肪酶的测定。以橄榄油为底物，经胰脂肪酶水解后产生脂肪酸，用氢氧化钠液滴定。*第45页，共63页，星期日，2025年，2月5日第1页，共63页，星期日，2025