基本信息

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文档摘要

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基本過程：1.從一對處於不同發育階段（或不同基因型）的細胞群體中分離總mRNA，並用3’-端錨定引物作反轉錄合成第一鏈cDNA;2.用5’-端隨機引物和3’-端錨定引物組成的引物對，在加入放射性同位素標記的dNTP的條件下，以第一步反轉錄產物作範本進行PCR擴增。3.將擴增樣品在變性的DNA測序膠中進行電泳分離；4.將有關的差別表達的DNA條帶從測序膠上切割下來回收其DNA片斷；5.膠塊中的DNA量非常少，不能用於克隆，需進行二次擴增；6.將克隆的特定的DNA分別同基因組DNA及總mRNA作Southern或Northern雜交，測序；7.以此目的片斷作探針從cD