是将少量样品铺放在密度梯度介质最上层，进行离心，微粒按其大小不同在梯度液中各自形成不连续的区带一种离心方法。

这种方法要求介质的最大梯度密度比沉降颗粒中最小的密度小，而且要选择适当转速，使沉降最快的颗粒到达管底以前停止离心。由于它是利用不同大小的颗粒在离心场中沉降速度不同而在介质中分层，因此它适用于大小有别而密度相似的颗粒的分离。

这种方法可以用来测定大分子的沉降系数，一般用水平转头。;梯度介质：为了使沉降系数比较接近的颗粒得以分离，必须配制好适宜的密度梯度系统。密度梯度系统是在溶剂中加入一定的溶质制成的。这种溶质称为梯度介质。一般是一种化学惰性，并能很快扩散的材料。

常用的梯度介质有蔗糖、甘