几十次药物结合蛋白的DARTS实验经验总结(包括实验结果分析

和各种成败细节)

DARTS实验原理：小分子配体与靶蛋白结合后可以稳定靶蛋白，增强其对蛋白水解醉水解作用的抗性。简而言之就是小分子药物结合蛋白质后，水解酶水解该蛋白时更难被降解了。实验步骤：1、蛋白液的制备；2、小分子药物和蛋白孵育(实验分组);3、链零蛋白酶与蛋白复合物孵育；4、免疫印迹、考马斯亮蓝染色和银染等。

实验中涉及主要试剂：链酶蛋白酶(上海源叶公司),小分子药物茯苓酸PA,293T细胞，六孔板，蛋白表达质粒，转染试剂PEI,BCA蛋白浓度试剂盒(索莱宝),金属加热模块等。

一、实验过程

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