?氨基酸：甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等等。因培养基的种类不同，其添加种类和浓度不同。?肌醇：又称环己六醇，促进糖类的相互转化，维生素、激素的利用作用，使培养物快速生长。?腺嘌呤、硫酸盐等激素：加入培养基时，可促进芽、根的形成和生长。根据培养基的植物不同，决定是否添加。第63页，共90页，星期日，2025年，2月5日?琼脂:是从海藻中提取的一种高分子碳水化合物，其主要作用是使培养基在常温下凝固，但不参与代谢。?活性炭:主要目的是利用其吸附能力，减少一些有害物质的影响，如可以防止酚类物质污染而引起组织褐化死亡。3、附加物这类物质为非植物细胞生长所必须，但对细胞生长有利,主要包括琼脂和活性炭。第64页，共90页，星期日，2025年，2月5日?作用：提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质和生长激素等。?这类物质常指天然提取物：?麦芽提取物、?椰乳、?鲜果汁、?酵母提取物4、其它有益有机添加物或未知复合成分第65页，共90页，星期日，2025年，2月5日5、pH值：即酸碱度，培养的植物材料大多数要求弱酸性的环境，一般将培养基调整至pH5.6—5.8。常用0.1mol/l氢氧化钠或盐酸来调节培养基的pH。注意：第一、经高温高压灭菌后，培养基的pH会下降0.2-0.8,故调整后的pH应该高于目标pH0.5个单位；第二、pH的大小会直接影响到琼脂的凝固能力，一般pH大于6.0时，培养基就会变硬，低于5.0时琼脂就不能很好地凝固。第66页，共90页，星期日，2025年，2月5日6、激素?在培养基中，其各种成分对培养物影响最大的最显著的就是激素。激素的种类、浓度、以及配比都会显著的影响愈伤组织的形成、不定根、不定芽的分化，胚状体的形成等；?组织培养中使用的激素有的是天然的，如脱落酸（ABA）等，有的是合成的，如二氯苯氧乙酸（2，4－D）。第67页，共90页，星期日，2025年，2月5日（一）、激素的种类1、生长素2、细胞分裂素3、赤霉素4、脱落酸第68页，共90页，星期日，2025年，2月5日1、生长素类?生长素是指能引起完整组织中的细胞扩展的化合物。?在自然界中，即内生生长素影响茎和茎节的伸长、向性、顶端优势、叶片脱落和生根等现象?在组织培养中的主要作用是：诱导愈伤组织的产生，促进细胞脱分化，促进细胞的伸长，促进生根。第69页，共90页，星期日，2025年，2月5日?组织培养中常用的生长素有：二氯苯氧乙酸（2，4－D）；萘乙酸（NAA）吲哚乙酸（IAA）；吲哚－3－丁酸（IBA）萘氧乙酸（NOA）；对氯苯氧乙酸（P-CPA）三氯苯氧乙酸（2，4，5－T）；生根粉（ABT）NAA、IAA、IBA易引起生根，2，4－D、2，4，5－T有利于愈伤组织的诱导和生长。第70页，共90页，星期日，2025年，2月5日?主要作用：是诱导愈伤组织的形成、胚状体的产生以及试管苗的生根，更重要的是配合一定比例的细胞分裂素诱导腋芽及不定芽的产生；?作用的强弱顺序为：2，4-DNAAIBAIAA第71页，共90页，星期日，2025年，2月5日?溶解方法：0.1MNaOH或95％酒精，以前者为好?保存：配成一定浓度后，冰箱冷藏保存第72页，共90页，星期日，2025年，2月5日第二部分
基本操作技术基本操作技术主要是围绕无菌操作技术展开的一系列操作技能，内容主要包括：一．洗涤技术二．灭菌、消毒技术三、接种技术第31页，共90页，星期日，2025年，2月5日一、洗涤技术?、洗涤目的：去除杂物，降低带菌量?、根据洗涤对象的不同，主要分为：器皿洗涤（包括玻璃、塑料、搪瓷、不锈钢器皿）培养材料洗涤第32页，共90页，星期日，2025年，2月5日（一）器皿洗涤根据洗涤对象的具体情况可分为以下三种：特殊洗涤微生物大量污染的洗涤常规洗涤第33页，共90页，星期日，2025年，2月5日?常规洗涤△自来水洗去油渍、霉菌等脏物；△温肥皂水中浸泡一定时间后用刷子刷净；△自来水冲洗干净，至瓶壁不挂水珠为止；△蒸馏水淋洗内外壁△将玻璃器皿倒置：晾干或