安徽pcr考试题及答案
一、单项选择题（每题2分，共10题）
1.PCR技术的中文全称是（）
A.聚合酶链式反应B.核酸杂交反应C.基因测序反应D.蛋白质印迹反应
2.PCR反应体系中不包括以下哪种成分（）
A.模板DNAB.引物C.限制性内切酶D.Taq酶
3.以下哪种碱基配对原则适用于PCR反应（）
A.A-CB.G-TC.A-TD.C-U
4.PCR反应的变性温度一般为（）
A.50℃左右B.72℃左右C.94℃左右D.37℃左右
5.PCR反应中延伸时间主要取决于（）
A.模板浓度B.引物长度C.扩增片段长度D.Taq酶活性
6.引物设计时，其长度一般为（）
A.10-15bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp
7.下列哪项不是PCR技术的应用领域（）
A.疾病诊断B.基因克隆C.蛋白质结构分析D.法医鉴定
8.进行PCR实验时，使用的微量移液器量程为2-20μl，若吸取10μl液体，读数应是（）
A.010B.100C.001D.101
9.关于PCR产物的检测，常用的方法是（）
A.分光光度法B.凝胶电泳C.离心法D.层析法
10.PCR技术发明于（）
A.1973年B.1983年C.1993年D.2003年
二、多项选择题（每题2分，共10题）
1.PCR反应体系包含的主要成分有（）
A.模板DNAB.引物C.dNTPsD.Taq酶E.缓冲液
2.引物设计的基本原则包括（）
A.长度合适B.GC含量适中C.避免引物二聚体D.与模板特异性结合E.含有稀有碱基
3.PCR技术的特点有（）
A.特异性强B.灵敏度高C.操作简便D.快速E.可定量分析
4.影响PCR反应的因素有（）
A.模板质量B.引物浓度C.Taq酶活性D.反应温度E.循环次数
5.PCR技术可应用于（）
A.病原体检测B.基因分型C.肿瘤诊断D.遗传疾病诊断E.植物品种鉴定
6.在PCR实验中，需要注意的事项有（）
A.防止污染B.准确加样C.控制反应条件D.妥善保存试剂E.定期校准仪器
7.以下属于PCR反应步骤的有（）
A.变性B.退火C.延伸D.复性E.水解
8.下列哪些物质可作为PCR的模板（）
A.基因组DNAB.线粒体DNAC.cDNAD.质粒DNAE.病毒核酸
9.用于PCR产物检测的方法有（）
A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.荧光定量PCRD.测序E.酶切鉴定
10.PCR技术的发展衍生出了哪些相关技术（）
A.荧光定量PCRB.巢式PCRC.多重PCRD.逆转录PCRE.原位PCR
三、判断题（每题2分，共10题）
1.PCR技术可以扩增任意长度的DNA片段。（）
2.引物浓度越高，PCR反应效果越好。（）
3.Taq酶具有5→3聚合酶活性和3→5外切酶活性。（）
4.PCR反应的退火温度越高，引物与模板的结合越稳定。（）
5.进行PCR实验时，实验台面不需要进行清洁消毒。（）
6.只要引物设计正确，PCR反应就能得到预期产物。（）
7.荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量和相对定量分析。（）
8.不同来源的模板DNA进行PCR反应时，反应条件都一样。（）
9.PCR产物的特异性只取决于引物。（）
10.PCR技术只能用于扩增DNA，不能用于扩增RNA。（）
四、简答题（每题5分，共4题）
1.简述PCR技术的基本原理。
答案：PCR技术是通过高温变性使双链DNA解开成单链，低温退火让引物与模板单链互补结合，中温延伸在Taq酶作用下以dNTP为原料合成新的DNA链，经过多次循环实现特定DNA片段的大量扩增。
2.简述引物设计的要点。
答案：长度15-30bp左右；GC含量40%-60%；避免引物内部和引物之