微生物检测基本技术第1页,共21页,星期日,2025年,2月5日染色观察第2页,共21页,星期日,2025年,2月5日革兰氏染色1884年丹麦医师Gram所发明第3页,共21页,星期日,2025年,2月5日革
兰
氏
染
色
法1.涂片固定2.单染—结晶紫染液第一次染色1min第4页,共21页,星期日,2025年,2月5日3.媒染—碘-碘化钾溶液浸湿30S4.脱色—95%乙醇溶液进行颜色洗脱5.复染—红色的藩红染液第二次染色
第5页,共21页,星期日,2025年,2月5日呈现第二次染色的效果红色;称革兰氏阴性菌(红阴G-)细菌呈现第一次染色的效果紫色,革兰氏阳性菌(紫阳G+);第6页,共21页,星期日,2025年,2月5日划线接种,分离纯化Inoculatinganagarplatetoobtainsinglecolonies第7页,共21页,星期日,2025年,2月5日第8页,共21页,星期日,2025年,2月5日灼烧第9页,共21页,星期日,2025年,2月5日第10页,共21页,星期日,2025年,2月5日第11页,共21页,星期日,2025年,2月5日生化反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。微生物生化反应:糖酵解试验淀粉水解试验V-P试验甲基红(MethylRed)试验靛基质(Imdole)试验枸椽酸盐试验:尿素酶(Urease)试验三糖铁(TSI)琼脂试验第12页,共21页,星期日,2025年,2月5日糖酵解试验不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。第13页,共21页,星期日,2025年,2月5日淀粉水解试验某些细菌可以产生分解淀粉的酶,把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后,遇碘不再变蓝色。第14页,共21页,星期日,2025年,2月5日V-P试验某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物,称V-P(+)反应。第15页,共21页,星期日,2025年,2月5日