细胞的形态与记数第1页，共21页，星期日，2025年，2月5日目的与要求1.初步掌握临时制片技术和显微绘图的方法；2.熟悉光镜下动、植物细胞的基本形态、结构；3.掌握活细胞计数的使用方法。4.掌握显微测微尺的使用方法。第2页，共21页，星期日，2025年，2月5日临时制片方法及细胞形态的观察第3页，共21页，星期日，2025年，2月5日（一）人口腔黏膜上皮细胞制片与观察取一载玻片，夹持载玻片两端，用清洁纱布擦净；在载玻片中央滴1滴0.5%次甲基蓝染液；用消毒牙签的钝端轻轻刮取颊部内侧的口腔黏膜上皮细胞；将牙签在载玻片的染液中来回滚动数次；染色2-3分钟，盖上盖玻片，注意不要有气泡产生；观察。先低倍，再高倍。细胞核被染成深蓝色。第4页，共21页，星期日，2025年，2月5日（二）洋葱表皮细胞的制片与观察取一擦净的载玻片，滴1滴1%碘液；将洋葱嫩茎用小刀切成小块，取1块肉质鳞叶，用镊子在其内表面轻轻撕下一小块表皮，再用剪刀剪成小块，置于载玻片的染液中铺平；染色2-3分钟，盖上盖玻片；先低倍，再高倍。细胞核被染成深黄色。第5页，共21页，星期日，2025年，2月5日第6页，共21页，星期日，2025年，2月5日细胞计数第7页，共21页，星期日，2025年，2月5日细胞计数的原理细胞计数时，先将培养细胞或血细胞稀释成细胞悬液，然后将细胞悬液滴入细胞计数板内，计数计数板上计数室四大格内的细胞数。根据计数室的容积及稀释倍数，即可计算出细胞浓度。第8页，共21页，星期日，2025年，2月5日1.制备血细胞悬液取1只乙醚麻醉过的蟾蜍，心脏取血1ml，用Ringer液稀释一定倍数制成细胞悬液；同时用蟾蜍血制备血涂片，室温晾干备用；第9页，共21页，星期日，2025年，2月5日第10页，共21页，星期日，2025年，2月5日2.熟悉血细胞计数板血细胞计数板呈长方形，有2个计数室。每个计数室分为9个大正方格，每个大格边长1mm,计数室的底与盖玻片间的距离为0.1mm，即每大格的容积为1mm×1mm×0.1mm=0.1mm3四角的每个大格被分为16个中格；中央的大格被分为25个中格，每个中格被分为16个小格。第11页，共21页，星期日，2025年，2月5日第12页，共21页，星期日，2025年，2月5日3.滴片将盖玻片擦净，盖在血球计数板槽上，取制备好的蟾蜍血细胞悬液1滴滴于血球计数板的盖玻片一侧边缘，让细胞悬液自然流入计数室内。注血细胞悬液不可滴得过多，如溢出或盖玻片内有气泡必须重做，否则将影响计数结果。第13页，共21页，星期日，2025年，2月5日4.计数在低倍镜下数出计数板上计数室四角大格中的细胞数，如细胞压在格线上时，数上不数下，数左不数右。第14页，共21页，星期日，2025年，2月5日5.细胞浓度计算将四大格的细胞总数除以4，得出平均每大格的细胞数，每大格的容积为0.1mm3，乘以10000即为1000mm3（1ml）。不同稀释倍数细胞悬液的细胞浓度可用下式计算：细胞浓度（细胞数/ml)=(四大格的细胞数/4）×10000×稀释倍数第15页，共21页，星期日，2025年，2月5日