DADS对HL-60细胞周期的DNA含量的影响第62页,共94页,星期日,2025年,2月5日CD11bCD33DADS对HL-60细胞表面分化抗原的影响第63页,共94页,星期日,2025年,2月5日流式细胞术检测结果显示经SB和100mg/kg、200mg/kgDADS作用后,MGC803细胞移植瘤细胞G2/M期百分率分别比NS对照组增加1.92、2.22和3.37倍(P<0.05),表明DADS呈浓度依赖性对移植瘤细胞有G2/M期阻滞。第64页,共94页,星期日,2025年,2月5日不同浓度DADS处理后移植瘤细胞周期的变化NS组SB组DADS50mg·kg-1组DADS100mg·kg-1组DADS200mg·kg-1组第65页,共94页,星期日,2025年,2月5日研究表明,cyclin有7种,它们的表达随细胞周期时相的转换而发生改变,不同cyclin须与相应的CDK结合才能促使细胞周期的完成。细胞增殖分裂过程中,cyclins有如下变化:细胞由G0期进入G1期时,cyclinD1-3合成均增加;G1/S期时,cyclinDs及cyclinE降解,cyclinA合成增加;S期进入G2期时,cyclinB合成逐渐增加积累;G2/M期转换时,cyclinA、B降解,cyclinDs、E合成增加。cyclinD1在细胞增殖过程中意义最大,是G1期细胞增殖信号的关键蛋白。许多作者将它视为一种癌基因,其过度表达可导致细胞增殖失控,最终形成肿瘤。第66页,共94页,星期日,2025年,2月5日倒置显微镜观察MGC803细胞(×20)DADS组(×20)第30页,共94页,星期日,2025年,2月5日普通光镜观察MGC803细胞HE(×20)DADS处理组HE(×20)第31页,共94页,星期日,2025年,2月5日电镜观察微绒毛是良恶性细胞区分的重要标志之一,本实验通过透射电镜和ConA凝集性实验证实了MGC803细胞在DADS处理后,细胞表面微绒毛明显减少,对ConA的凝集率下降,表明MGC803细胞生物学行为表现出恶性性下降。未处理组MGC803细胞核浆比例大,核仁均质,以1-2个核仁细胞为主;胞质内细胞器稀少,细胞分化程度低。DADS处理的MGC803细胞表面微绒毛减少,细胞核浆比例下降,胞质内细胞器丰富,有散在的核糖体,细胞核和线粒体水肿退变,细胞之间有腺腔结构形成并可见细胞间连接结构,细胞分化好。第32页,共94页,星期日,2025年,2月5日第33页,共94页,星期日,2025年,2月5日MGC803细胞核浆比例大,核畸形,线粒体水肿(5000倍)第34页,共94页,星期日,2025年,2月5日图示DADS组细胞电镜结构第35页,共94页,星期日,2025年,2月5日图示DADS组细胞电镜结构第36页,共94页,星期日,2025年,2月5日结构的破坏及功能的抑制都是细胞转化早期的异常表现,并与细胞增殖失控及其它恶性行为有关,而微管解聚与DNA合成的启动有关。本实验中观察到DADS处理后,MGC803细胞出现微丝微管合成增加与重组装,呈现规则的放射状分布,提示瘤细胞恶性表型下降,表现为去恶化。第37页,共94页,星期日,2025年,2月5日MGC803细胞骨架考马丝亮蓝染色(×20)DADS组细胞骨架考马丝亮蓝染色(×20)第38页,共94页,星期日,2025年,2月5日细胞结构观察MGC803细胞骨架呈弥散荧光间接免疫荧光染色(×100)DADS组细胞骨架阳性,呈黄绿色荧光环绕胞核。间接免疫荧光染色(×100)第39页,共94页,星期日,2025年,2月5日划痕标记后数分钟即可观察到黄色荧光传播,人胃癌MGC-803细胞不显示荧光染料的传播,表明无间缝隙连接通讯功能。DADS处理后,黄色荧光分布在伤沿细胞列和相邻的数列细胞内,荧光强度从伤沿细胞列到临近数列细胞逐渐减弱,以伤沿细胞列最强,表明间缝隙连接通讯功能恢复。第40页,共94页,星期日,2025年,2月5日细胞间缝隙连接通讯功能未处理人胃癌