实验六培养基的配置及灭菌第1页，共12页，星期日，2025年，2月5日一、实验目的了解配制培养基的原理，并掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解高压蒸汽灭菌的原理，并掌握其具体操作方法第2页，共12页，星期日，2025年，2月5日二、实验原理培养基由人工配制的适合微生物生长、繁殖或适合积累代谢产物的营养基质。培养基用途1、菌种分离、培养和分类鉴定；2、菌种保藏；3、生理生化性质的研究；4、发酵生产第3页，共12页，星期日，2025年，2月5日二、实验原理培养基配置需满足的条件：物质条件：六大营养要素---C源、N源、能源、无机盐、生长因子、水；理化条件：pH、aw、Eh等第4页，共12页，星期日，2025年，2月5日高压蒸汽灭菌锅注意事项：排净冷空气；灭菌终了，缓慢降压；压力降为0，取出物品。灭菌锅的原理第5页，共12页，星期日，2025年，2月5日三、实验器材材料牛肉膏蛋白胨培养基药品；马丁孟加拉红-链霉素培养基药品仪器电子天平；高压蒸汽灭菌锅其他三角瓶，试管，培养皿，移液管第6页，共12页，星期日，2025年，2月5日四、实验步骤（一）培养基的配制从培养基的物理状态可分为：1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。2.固体培养基：在液体培养基中加入1.5~2%左右的凝固剂3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2~0.7%凝固剂而成的半固体状培养基。第7页，共12页，星期日，2025年，2月5日培养基的配制方法和步骤称量：按照配方正确称取各种原料(除了琼脂)放于搪瓷杯中。溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，溶解。调pH值：用2NNaOH或2NHCl调pH，用pH试纸对照。分装：注意不要污染棉塞。包扎成捆，做好标记，注明班级，组别，何种培养基等。第8页，共12页，星期日，2025年，2月5日两种培养基的配方1、牛肉膏蛋白胨培养基100ml牛肉膏0.3g蛋白胨1g氯化钠0.5g琼脂2g水100mLpH7.2~7.4灭菌121~126℃，20min第9页，共12页，星期日，2025年，2月5日