基本信息
文件名称：Brunke布林凯斯 CRISPR-Cas9 基因编辑操作手册.pdf
文件大小：238.59 KB
总页数：2 页
更新时间：2025-09-10
总字数：约2.47千字
文档摘要
CRISPR-Cas9基因编辑操作手册
CRISPR-Cas9技术通过人工设计tracrRNA/crRNA，改造成具有引导作用的sgRNA，以
引导cas9对DNA的定点切割，造成DNA双链的断裂，然后细胞可以利用NHEJ或者同源
重组的方式实现基因敲除或对基因精确编辑的目的。
操作步骤
靶基因分析
根据靶基因的名称和种属信息，在NCBI、EnsemblGenomes或其他分子生物学网站上
进行查找，搜索到该基因的信息，并明确CDS外显子部分。
sgRNA位点设计
确定待敲除位点，对于蛋白编码基因，如果该蛋白具有重要结构功能域，