基本信息
文件名称：质粒抽提技术.ppt
文件大小：633.5 KB
总页数：21 页
更新时间：2025-09-19
总字数：约4.75千字
文档摘要
*(1)裂解细胞
???基本上先加入溶菌酶作用一段时间,破壁后再加入非离子型去污剂或直接加入碱性SDS等以及作煮沸处理,以便破壁与膜,处理的同时也能去除细胞碎片,染色体DNA等杂质.非离子去污剂法较温和,适用于抽提10kb左右的质粒;而煮沸法与碱性SDS法相对较剧烈,只能抽提小于10kb的质粒.本实验采用碱性SDS法.
(2)分离
???细菌基因组均比较大,如大肠杆菌的染色体约有4700kb长,在处理细胞过程中断裂成不同长度的双链DNA片段.当溶液的pH值调节到大于12时,双链DNA中的氢键被破坏,于是染色体DNA双链分离成单链;而超螺旋状态的质粒DNA仅仅部分氢键被破坏,只是部分双链解离