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文档摘要

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质粒转化操作手册

常用转化方式有热激法和电转化法，下面以大肠杆菌为例，分别简述两种方法操作步骤。

热激法转化

实验试剂及仪器

DH5α感受态细胞，LB液体培养基，移液枪，离心管，无菌培养皿，恒温水浴锅，离心

机，超净工作台等。

操作方法

1）从-80℃冰箱中取100μL感受态细胞悬液，置于冰上融化；

2）加入20ng质粒DNA（体积不超过5μL)，轻轻摇匀，冰上放置30分钟；

3）42℃水浴中热击60-90sec，热激过程中不要移动离心管，热激后迅速置于冰上冷却3~5

min；

4）向管中加入1mLLB液体培养基（不含抗生