（三）、苹果茎尖脱毒快繁技术1、材料与消毒：带芽或茎尖的茎段；常规消毒，用无菌水洗3～5次；切茎尖约0.1～0.5mm。2、芽的诱导：MS或LS+BA2+300～500CH或LH+3%蔗糖的培养基上，诱导芽的分化。3、继代增殖培养：MS+BA0.5～1+CH300培养基上增殖。4、生根培养：1/2MS或White，Nitsh附加IAA1、IBA0.2和GA33等。第二节果树脱毒与快繁第30页，共81页，星期日，2025年，2月5日（四）苹果花粉培养1、选材与预处理：选取中心花蕾吐红，周围花蕾明显增大，但花序尚未分离的花蕾，置于冰箱中1-3℃预处理。2、消毒：70%的酒精浸约0.5min，再在10%漂白粉上清夜中浸15～20min。3、胚状体诱导：接种到MS+2,4-D0.4+KT0.2+IAA4+3～8%蔗糖培养基上，25～30℃下培养。4、生根：同茎尖脱毒中所用方法。第二节果树脱毒与快繁第31页，共81页，星期日，2025年，2月5日（五）胚培养1、取材消毒：取授粉30～50d内的幼果，用70%酒精擦拭。取出种子，剥出幼胚或成熟胚。2、启动培养：接种在BA0.25+IAA0.5的1/2MS培养基上。培养条件为25～30℃和1500～2000lx光照14h。3、分化增殖：移植到加有BA0.5～1.0和CH300的1/2MS培养基上，在光下培养条件同上。4、生根培养：同茎尖培养。第二节果树脱毒与快繁第32页，共81页，星期日，2025年，2月5日二、葡萄的脱毒与快繁（一）、形态特征和生物学习性葡萄属落叶木质藤本植物，葡萄地上部分的茎细。节上具有卷须，可向上攀援。叶近圆型或卵型，3～5裂。葡萄原产于温带地区，不太抗寒。葡萄的根系抗寒力很弱，在－5～－7℃时即受冻。第二节果树脱毒与快繁第33页，共81页，星期日，2025年，2月5日（二）、葡萄的组织培养1、选材接种：从生长旺盛的葡萄新梢顶端取1～2㎝的茎尖。消毒。分离出约2㎜长的茎尖，接种到培养基上。2、培养基：MS培养基（无机盐减半为好），再添加BA1～2，NAA0.01，LH100，蔗糖2%，琼脂0.6%，而B5培养基愈伤组织化严重，茎尖生长不好。3、苗分化：BA0.5，同时添加GA30.2，黑暗处理可促进幼茎的伸成，提高成苗率。4、根分化：将苗转入MS+IAA0.4+NAA0.05培养基中进行生根。第二节果树脱毒与快繁第34页，共81页，星期日，2025年，2月5日（三）、葡萄无病毒苗的培养?葡萄受到26种病毒的危害。由于病毒的危害，葡萄的长势减弱，产量降低，果实的糖分含量减少，风味变劣。葡萄卷叶病是危害最大的病毒病。第二节果树脱毒与快繁第35页，共81页，星期日，2025年，2月5日（三）、葡萄无病毒苗的培养?1、热处理脱毒：（1）葡萄无性系处理：材料置于38℃，CO21200×10-6的人工空气侯箱内。经30min处理，较易从枝条尖端或休眠芽中除去扇叶病毒。（2）将感染材料的修面芽插入健康指示植物的蔓中，然后在38℃的环境中保持2个月，以后取出枝条和接种芽继续生长。（3）直接将葡萄蔓浸泡在50℃的温水中10～20min，可以治疗皮尔斯病，但不能治疗黄点病及卷叶病。第二节果树脱毒与快繁第36页，共81页，星期日，2025年，2月5日2、组织培养脱毒技术（1）、茎尖接种后变绿、增大期的培养：在25℃，相对湿度80%，16h的长日照条件下水培生成的嫩茎取0.2～0.3mm茎尖接种于1/2MS，添加NAA0.1，BA1.0，Kt0.5，腺嘌呤4.0，蔗糖30g/L，琼脂6.0，pH5.8培养基上。（2）从畸形叶和茎叶伸长期：采用1/2MS，添加IAA0.2，BA0.1，KT0.5，腺嘌呤4.0，蔗糖30g/L的培养基。（3）地上部和地下部的伸长期：Galzy（1964）培养基，添加NAA0.1。（三）、葡萄无病毒苗的培养?第二节果树脱毒与快繁第37页，共81页，星期日，2025年，2月5日三、草莓的脱毒与快繁（一）、形态特征和生物习性草莓（Fragaria）属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。草莓喜光但又较耐阴，要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。第二节果树脱毒与快繁第38页，共81页，星期日，2025年，2月5日（二）、草莓脱毒苗的培养1、热处理脱毒将草莓植株在40～41℃温度下处理4～6周。2、微茎尖脱毒（1）、初代培养：取草