流式细胞术贝克曼第1页，共23页，星期日，2025年，2月5日1.检测淋巴细胞亚群，监测细胞免疫状态2.白血病/淋巴瘤免疫分型3.HLA组织配型及HLA与某些疾病的关系4.干祖细胞的定量及成分分析.5.其它:粘附分子;TCR多态性检测;肿瘤癌基因及抑癌基因蛋白产物的检测;细胞内酶;耐药蛋白的分析等等。第2页，共23页，星期日，2025年，2月5日临床应用疾病诊断:为疾病诊断提供直接的或支持诊断的依据免疫调节：细胞因子/受体的相互作用共刺激分子受体/配体的相互作用发病机理：肿瘤的发病与机体的免疫力低下、以及信号传递障碍有关药物/疫苗效果的评价：肿瘤生物治疗的时机选择、以及效果的监测免疫状态评价：移植、放化疗等.第3页，共23页，星期日，2025年，2月5日细胞周期分析:在细胞周期(G0，G1，S，G2，M)的各个时期，DNA的含量随各时相呈现出周期性的变化。通过核酸染料标记DNA，并由流式细胞仪进行分析，可以得到细胞各个时期的分布状态，计算出G0/G1%，S%及G2/M%。了解细胞的周期分布及细胞的增殖活性。也可利用细胞周期蛋白（CYCLIN）、Ki67、核增殖抗原（PCNA）等，对细胞周期进行精确的分期：G0、G1、S、G2、M.DNA含量及细胞周期分析第4页，共23页，星期日，2025年，2月5日G2MG0G1s02004006008001000G0G1sG2MDNAAnalysisDNAcontentCount2N4NNormalCellCycle第5页，共23页，星期日，2025年，2月5日1.肿瘤的早期诊断。2.肿瘤的良恶性判断。3.观察细胞的增殖状态及周期分布。4.疗效监测第6页，共23页，星期日，2025年，2月5日细胞功能分析1.吞噬功能试验2.氧爆发试验3.根据T淋巴细胞分泌细胞因子的不同将CD4+或CD8+分为介导细胞免疫的I型细胞和介导体液免疫的II型细胞.4.药物泵的功能检测5.NK细胞的肿瘤杀伤活性检测6.血小板的粘附,聚集功能检测第7页，共23页，星期日，2025年，2月5日树突状细胞分析（DendriticCells,DC)DC是主要的抗原递呈细胞，同时又是重要的先天免疫细胞，还是具有免疫调控功能的一个细胞群，没有发现特异性的抗原标记DC研究的主要内容包括直接分析计数、体外诱导检测,一般分为两群－PDC,MDC当前DC检测的方法：1）Lin-,CD11c,CD123,同时可能表达CD80,CD86,CD83,DR等2）利用BDCA1,2,3,4对外周血或其它组织DC进行分析3）CD14+16/CD85/CD33,CD14+16/CD85/CD123第8页，共23页，星期日，2025年，2月5日T细胞分析相对计数－淋巴细胞亚群数量检查项目和意义疾病CD3CD4CD8CD4/CD8NK自身免疫病降低增高降低降低AIDS降低严重降低增高降低SARS降低降低降低降低降低慢性活动性肝炎、肝硬化降低正常或增高降低降低肿瘤降低降低增高降低降低第9页，共23页，星期日，2025年，2月5日CD4细胞绝对计数对AIDS病人的诊断、疗效和预后有重要的指导意义，一般认为CUTOFF值为200/ul.绝对计数是加入浓度已知的标准微球与标本一起测定，流式细胞仪控制软件在设置后能自动计算出浓度对任何细胞群体都可以进行绝对计数第10页，共23页，星期日，2025年，2月5日Th1Th2细胞因子分泌细胞测定根据产生的细胞因子的类型和生物学功能,人的ＣＤ4+Ｔ细胞可以分为Ｔｈ1、Ｔｈ2Ｔｈ1细胞产生ＩＬ2、ＩＬ12、ＩＦＮγ、ＴＮＦβ等细胞因子,主要参与细胞介导的免疫反应、迟发性过敏反应,并在清除病毒等细胞内致病因子方面起着重要作用Ｔｈ2细胞分泌ＩＬ4、ＩＬ5、ＩＬ6、ＩＬ10、ＩＬ13等细胞因子,主要促进体液免疫反应,中和胞外病原体相应地，CD8+T细胞也可以分为Tc1和Tc2Th1细胞：介导细胞免疫、细胞毒性T细胞的生长和活化、巨噬细胞的活化、介导迟发型过敏反应。其功能亢进将导致炎症慢性迁延，器官特异性自身免疫病，急性排异反应和接触性皮炎等的发病和免疫病理损伤。Th2细