男性不育与辅助生殖技术;“百米冲刺”;第三页,共七十八页。;男性不育定义;男性不育的概况;男性不育的病因;;男性不育的诊断
——病史;男性不育的诊断
——体格检查;男性不育症实验诊断基础;1.男性不育症实验诊断概况;男性不育症诊疗基本程序(WHO):
不育男性
病因学诊断
治疗或偿试治疗男科学
考虑ART助孕
选择最适ART助孕方式辅助生殖技术;男性不育症现代实验诊断技术
精液计算机辅助分析
精子功能检测
精液免疫生化检验
细胞遗传学检查
分子生物学
尤以精液免疫生化检验发展得最快,具有十分重要的诊断价值。;精液常规参考值
(WHOLaboratoryManual,CUP,4thedn,1999);精液异常的定义
(WHOLaboratoryManual,CUP,4thedn,1999);第十六页,共七十八页。;
生精功能评价指标:
血激素:FSH、LH、
T、PRL、E2
血清抑制素B
生殖细胞凋亡
染色体及无精子候
选基因
;常用血激素;血激素检测注意事项:
FSH浓度水平相对稳定可靠;
LH、T、PRL浓度均易产生生理波动;
应注意对抽血时间的有序把握,及注意对抽血前影响因素的控制。;;附睾分泌功能指标----精浆中性α-葡糖苷酶;精囊分泌功能指标-----精浆果糖;前列腺分泌功能指标(WHO推荐)
精浆柠檬酸定量(酶法)
(Seminalplasmacitricacid)
精浆酸性磷酸酶定量(PNPP法)
(Seminalplasmaacidphosphatase)
精浆锌定量(5-Br-PAPS法)
(Seminalplasmazinc);静止性生殖道感染性检测;精液圆细胞(rouudcell):
生殖道上皮细胞、生精细胞和白细胞
统称之。
正常精液:
圆细胞数5×106/ml;
白细胞数1×106/ml。
;抗精子抗体
anti-spermantibody
⑴血清AsAb检测指标的局限性
a)男性特有的血睾屏障对精子施行封闭式保护;
b)精子抗原的复杂性给诊断试剂的制备带来困难.
⑵精子膜表面抗体(包被抗体)检测的意义
①避免精子膜内抗原释放,反应具特异性;
②检测活力精子,更具临床意义.;⑶精子膜表面抗体检测的方法(WHO推荐)
混合凝集反应(mixedagglutinationreaction,MAR)
特点:免疫性不育过筛试验,检测IgG型抗体。
免疫珠试验(immunobeadtest,IBT)
特点:特异性较MAR更高,可进行IgG、IgA、IgM
抗体分型。;MAR、IBT结果观察;⑷男性免疫性不育的确诊
a)MAR与IBT试验结果并非经常一致。
b)男性免疫性不育的确证需要在MAR或IBT阳性基
础上附加其他试验,附加试验可以是前者的重复
试验、精子-宫颈粘液接触试验、精子-宫颈粘液
毛细管试验。
c)MAR:≥10%为可疑,50%有确定临床意义。
IBT:≥20%为可疑,50%有确定临床意义。;性交后试验;精子低渗膨胀试验(HOS);第三十二页,共七十八页。;精子顶体酶
acrosin;检测方法:
Kennedy法(BAPNA法):
精氨酸酰胺酶
BAPNA硝酰基苯胺
(BAPNA:Nα-苯甲酰-DL-精胺酸-ρ-硝酰基苯胺)
不足之处:
反应时间过长(3小时)
BAEE(苯甲酰精氨酸乙酯)法:;精子顶体酶活性检测标本留取;
顶体酶检测标本:原精液与洗涤后精子。
精子顶体酶活性检测常见实验检测错误。;精子悬液活性氧类物质(ROS)
reactiveoxygenspecies,ROS;精子形态学染色
SpermMorphologyStaining;精子形态学