《禽病防治技术》
血液中寄生虫检测技术
1目的
1.1使检测员熟悉并掌握动物血液中原虫进行检查（血液涂片检查法、
鲜血压滴检查法、虫体浓集法）。
2适用范围
2.1本实验适用于动物血液中原虫进行检测过程。
3试剂和仪器设备
3.1试剂和材料
注射器、载玻片、盖玻片、姬姆萨氏染液、瑞特氏染液、中性蒸
馏水或pH7.0缓冲液、3.8%的枸橼酸钠。
3.2仪器设备
显微镜、离心机。
4方法与步骤
4.1血液涂片检查法
翅静脉采血血制成涂片。
4.1.1姬姆萨氏染色法
4.1.1.1操作方法
~
血片干燥后，滴数滴无水甲醇固定2min3min，然后滴加姬姆萨
~
氏染色液，染色30min60min，用缓冲液或中性蒸馏水冲洗，自然干
燥后镜检。
4.1.1.2染色液配制
取姬姆萨氏染色粉0.5g、中性甘油25mL、无水中性甲醇25mL。
-1-
《禽病防治技术》
将染色粉置于研钵中先加少量甘油充分磨研，然后边加甘油边研磨，
直到甘油全部加完为止。将其倒入100mL的棕色瓶中，再用甲醇分几
次冲洗研钵，均倒入试剂瓶中。塞紧瓶塞后充分摇匀置于65℃温箱
~
中24h或室温下3天5天，期间不断摇动和过滤，滤液即为原液用时
~
将原液充分振荡后，用缓冲液或中性蒸馏水10倍20倍稀释。
4.1.2瑞特氏染色法
4.1.2.1操作方法
~
在血片上滴加瑞特氏染色液1滴2滴，染色1min后，加等量的
中性蒸馏水或pH7.0缓冲液与染液混合，5min后用中性蒸馏水或
pH7.0缓冲液冲洗，自然干燥后镜检。
4.1.2.2染色液配制
取瑞特氏染色粉0.3g、中性甘油3mL、无水甲醇(不含丙酮）97mL。
将染色粉与甘油一起在研钵中研磨，然后加入甲醇，充分搅拌，装入
~
色瓶内，塞紧瓶塞，经过2周3周，过滤后备用。该染色液放置时间
愈长效果愈好。
4.1.2.3缓冲液配制
第1液为磷酸氢二钠11.87g，加中性蒸馏水1000mL，第2液为
磷酸二氢钾9.077g，加中性蒸馏水1000mL。取第1液61.1mL与第2
液38.9mL混合，即成pH7.0缓冲液。
4.2鲜血压滴检查法
在载玻片上滴加一滴生理盐水，滴上一滴被检血液，充分混合，
加盖玻片、静置片刻后镜检。先用低倍镜暗视野检查，发现有可疑运
-2-
《禽病防治技术》
动虫体时，再换高倍镜检查。适用于伊氏锥虫的检查。
4.3虫体浓集法
适用范围适用于伊氏锥虫病和梨形虫病的检查。
4.3.1原理
其原理是锥虫或寄生有梨形虫的红细胞较正常红细胞的比重小，
所以在第1次沉淀时，正常红细胞下降，而锥虫或寄生有梨形虫的红
细胞尚悬浮在血浆中；第2次离心沉淀时，则将其浓集于管底。
4.3.2操作方法
翅静脉采血，按4:1的比例与3.8%的枸橼酸钠充分混合。取此
~
抗凝血6mL7mL，以500r/min离心沉淀5min，使其中大部分红细胞
沉降；然后将含有少量红细胞、白细胞和虫体的上层血浆移入另一支
离心管中，补加生理盐水，以2500r/min离心沉淀10min。取沉淀物
制成抹片，用姬姆萨氏或瑞特氏染色法染色镜检。
5结果分析与判断
禽血液中原虫常见的是住白细胞虫。在显微镜下观察到成熟的配
子体即可确诊，配子体主要有2种：
5.1沙氏住白细胞