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第十章
液相色谱分析法
一、影响分离的因素
factorsinfluencedseparation
二、分离类型的选择
choiceofseparationtypes
三、液相色谱的应用
applicationofHPLC
四、液相制备色谱
preparativeliquidchromatography
第四节
影响分离的因素与操作条件的选择
highperformanceliquidchromatograph
factorsinfluencedseparationandchoiceofoperationcondition
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一、影响分离的因素
factorsinfluencedseparation
1.影响分离的因素与提高柱效的途径
在高效液相色谱中,液体的扩散系数仅为气体的万分之一，则速率方程中的分子扩散项B/U较小，可以忽略不计，即：
H=A+Cu
故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示。
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液体的黏度比气体大一百倍，密度为气体的一千倍，故降低传质阻力是提高柱效主要途径。
由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。
液相色谱中，不可能通过增加柱温来改善传质。恒温
改变淋洗液组成、极性是改善分离的最直接的因素。
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2.流速
流速大于0.5cm/s时,H～u曲线是一段斜率不大的直线。降低流速，柱效提高不是很大。但在实际操作中，流量仍是一个调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。
3.固定相及分离柱
气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。
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二、分离类型选择
choiceofseparationtypes
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三、HPLC的应用
applicationofHPLC
1.环境中有机氯农药残留量分析
固定相：薄壳型硅胶(37～50?m)
流动相：正己烷
流速：1.5mL/min
色谱柱：50cm?2.5mm(内径)
检测器：差示折光检测器
可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。
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2.稠环芳烃的分析
稠环芳烃多为致癌物质。
固定相：十八烷基硅烷化键合相
流动相：20%甲醇-水～100%甲醇
线性梯度淋洗，2%/min
流速：1mL/min
柱温：50oC
柱压：70?104Pa
检测器：紫外检测器
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四、制备型液相色谱
preparativeliquidchromatography
获得高纯物质（色谱纯）的有效方法。
半制备柱（内径8mm，长度15～30cm），一次制备量０.1～１mg；
1.色谱柱的柱容量（柱负荷）
对分析柱：不影响柱效时的最大进样量；
对制备柱：不影响收集物纯度时的最大进样量；
超载：进样量超过柱容量。柱效迅速下降，峰变宽。
超载可提高制备效率，以柱效下降一半或容量因子k降低10%为宜。
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2.液相制备色谱的方法
收集组分时，通常有以下情况：
（1）可获得良好分离，主峰
使用制备柱，超载提高效率；
（2）两主成分之间的小组分；超载，分离切分使待分离组分成为主成分（富集）后，再次分离制备。
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3.制备型液相色谱
制备型液相色谱：结构与分析型一样，但泵流量大、进样量大、采用制备柱；柱后馏分收集器。
制备柱：内径20～50mm，柱长50cm。
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结束
学习目标
1、复述故事，深入理解文章内容，初步把握人物形象。
2、学会利用文中关键词句分析人物形象。
3、体会文章所揭示的深刻道理。
故事发生的时间、地点、人物、事件的起因、经过和结果要复述清楚。
看图复述课文内容
自学指导(一)
1、作者运用哪几种方法去刻画人物的形象？从文中找出具体句子进行分析。并说说你是如何看待这两个人物的。
2、从这个故事中你懂得了什么道理？
自学指导(二)
陈尧咨（善射）
卖油翁（善酌）
动作
神态
语言
睨之
无他，但手