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柔嫩艾美耳球虫微线蛋白1（EtMIC1）的克隆表达及功能初步研究

一、1.EtMIC1基因的克隆与序列分析

1.1EtMIC1基因的提取与纯化

(1)在本研究中，EtMIC1基因的提取与纯化工作首先从艾美耳球虫虫体中分离获取。具体操作步骤为：首先，采用改良的CTAB法提取虫体总RNA，并通过逆转录PCR技术合成cDNA第一链。随后，以cDNA为模板，通过PCR扩增EtMIC1基因片段，具体扩增条件为：94℃预变性5分钟，然后进入40个循环，每个循环包括94℃变性30秒、55℃退火30秒、72℃延伸30秒，最后在72℃下延伸10分钟。PCR产物经过琼脂糖凝胶