本研宄由吉林省科技发展计划项目
(No.20230202084NC)和国家自然科学基金
(No.)项目资助
ThisstudywassupportedbyScienceandTechnology
DevelopmentProgramofJilinProvince
(No.20230202084NC)andNationalNaturalScience
FoundationofChina(GrantNo..
吉林大学硕士学位论文原创性声明
本人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，
独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本
论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本
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日期：2024年6月3日
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论文级别：■硕士□博士
学科专业：兽医
论文题目：鸡球虫四价重组亚单位疫苗的制备
作者签名：指导教师签名：良
2024年6月3日
中文摘要
鸡球虫四价重组亚单位疫苗的制备
鸡球虫病是由一种或多种鸡艾美耳球虫引起的以肠道病变为主的寄生虫病。
该病在全球范围内广泛流行，感染率高，危害性大，给全球养鸡业造成巨大的经
济损失。目前公认的鸡球虫有7种。其中临床上以柔嫩艾美耳球虫（S+merb
tenella)、堆型艾美耳球虫(Eimeriaacervulina)、毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)
及巨型艾美耳球虫（￡+mer+amaxima)多发，并且常表现为两种及以上混合感染。
目前鸡球虫病的防治依赖于活疫苗和药物的使用，但由于弱毒活疫苗可能出现的
毒力返祖、强毒活疫苗使用不当易引起球虫病的爆发及药物治疗中出现的耐药性
虫株等限制性因素，研究者们正在进行包括亚单位疫苗在内的新型候选疫苗的探
索。亚单位疫苗表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞等。其
中毕赤酵母表达系统结合了原核生物的培养便利、增殖快速与真核细胞翻译后修
饰加工等优势，具有良好的应用前景。
目前已报道了Camk、NPmz19、3-1、NKA、LDH、ADF、TA4、SO7、CDPK3、
SAG10、IMP1和NA4等鸡球虫保护性抗原基因。本实验室前期研究中，通过将
柔嫩艾美耳球虫TA4、堆型艾美耳球虫3-1、巨型艾美耳球虫IMP1以及毒害艾
美耳球虫NA4的基因进行串联，并利用大肠杆菌及毕赤酵母表达系统构建了多
价亚单位疫苗。结果表明，与大肠杆菌表达的重组蛋白相比，由毕赤酵母表达的
重组蛋白在提供免疫保护方面表现更佳，ACI最高为180.61。近年来，研究发现
鸡球虫入侵阶段表达的基因能够提供显著的保护效果。为了探究不同球虫其它入
侵阶段保护性抗原基因融合表达的重组蛋白对鸡球虫感染的免疫保护作用，本研
究将柔嫩艾美耳球虫OTU(EtOTU)、毒害艾美耳球虫SAG10(EnSAG10)、
巨型艾美耳球虫ADF(EmADF)以及堆型艾美耳球虫LDH(EaLDH)