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SOD和GSH有没有既可以用紫外又可以用酶标仪的?
SOD可以用ELISA法,使用酶标仪在450nm波长检测。SOD的邻苯三酚自氧化法,使用紫外分光光度计在325nm或420nm波长测定。SOD的测定方法,包括邻苯三酚自氧化法和黄嘌呤氧化酶-NBT法,这两种方法都可以用紫外分光光度计,用酶标仪在560nm检测。因此,SOD确实有同时适用于紫外和酶标仪的方法。
接下来看GSH的检测。GSH的荧光检测方法,使用微孔板阅读器(酶标仪),但需要特定的荧光染料。GSH的可见分光光度法,使用紫外分光光度计在600nm波长测定,而ELISA法用酶标仪检测。此外,DTNB法在412nm波长,既可以用紫外也可以用酶标仪。因此,GSH同样存在两种仪器都适用的方法。
需要注意的是,不同方法的具体操作步骤和波长可能有所不同,要根据实际情况选择合适的试剂盒或方法。同时,确保实验条件和仪器设置符合要求,以获得准确的结果。
SOD检测方法
邻苯三酚自氧化法
紫外分光光度计:在碱性条件下,邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子,SOD抑制其氧化反应,通过检测325nm或420nm处吸光度变化计算酶活性。
酶标仪:同样基于邻苯三酚自氧化原理,在96孔板中进行反应,酶标仪测定560nm或450nm处吸光度。
黄嘌呤氧化酶-NBT法
紫外分光光度计:黄嘌呤氧化酶生成超氧阴离子,还原氮蓝四唑(NBT)形成蓝色甲臜,在560nm处检测吸光度。
酶标仪:利用微孔板格式,通过酶标仪测定560nm处吸光度变化,抑制率与SOD活性负相关。
ELISA法
酶标仪:基于双抗体夹心ELISA,通过酶标仪读取450nm处吸光度,定量SOD浓度。
GSH检测方法
DTNB比色法
紫外分光光度计:GSH与5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)反应生成黄色产物,在412nm处检测吸光度。
酶标仪:使用微孔板,通过酶标仪测定412nm处吸光度,计算GSH浓度。
荧光法(如DibromoBimane标记)
酶标仪:GSH与荧光探针结合后,通过酶标仪的荧光通道检测特定波长(如Ex380nm/Em470nm)的信号强度。
ELISA法
酶标仪:基于抗体夹心ELISA,酶标仪读取450nm处吸光度,定量GSH浓度。
注意事项
方法选择:根据实验需求(如灵敏度、样本量)选择合适方法。紫外分光光度计适合大体积样本或需高精度检测,酶标仪适合高通量筛选。
波长差异:不同方法需注意检测波长(如412nm、450nm、560nm等),确保仪器配备相应滤光片。
建议根据具体实验条件和仪器配置,参考相关文献或莱贸生化试剂盒说明书优化操作步骤。
本文由莱贸生物科技(上海)有限公司提供。有异议请?