(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN112680409A
(43)申请公布日2021.04.20
(21)申请号202011554925.2
(22)申请日2020.12.24
(71)申请人肌因美生物基因工程（上海）有限公
司
地址201306上海市浦东新区中国(上海)
自由贸易试验区临港新片区环湖西二
路888号C楼
(72)发明人杜剑波
(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限
公司11245
代理人陆惠中王永伟
(51)Int.Cl.
C12N5/077(2010.01)
A61L27/38(2006.01)
权利要求书1页说明书5页附图2页
(54)发明名称
一种基于Wnt-5A/Ror2信号通路用于美容细
胞再生的制剂
(57)摘要
本发明提供了一种基于Wnt?5A/Ror2信号通
路用于美容细胞再生的制剂和培养基，能够在提
高软骨细胞增殖能力及再生的同时改善与维持
软骨细胞表型，提高软骨细胞体内应用的稳定性
与安全性。本发明的细胞培养制剂可以降低基础
培养基中通常的血清的使用含量，并显著促进软
骨细胞的培养及再生，解决了美容软骨细胞培养
使用的培养基成分复杂，培养困难，生长速度慢
的问题。本发明的细胞增殖制剂是通过抑制Wnt?
5A/Ror2信号通路调控IL?1β诱导软骨细胞的增
殖及再生，因此，本发明的制剂可以作为一种信
A号因子用于软骨细胞的增殖及再生等，培养的细
9胞可以作为美容原料进一步应用于美容软骨损
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0伤修复等。本发明提供的方法具有操作简单、方
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6
2便的特点，适合推广应用。
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1
N
C
CN112680409A权利要求书1/1页
1.一种用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，包括基础培养基、浓度5?20％胎牛血
清和细胞增殖制剂，其特征在于，所述细胞增殖制剂为芦荟大黄素。
2.如权利要求1所述的用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，其特征在于，所述芦荟
大黄素的浓度为20?120μmol/L，优选40、60或80μmol/L。
3.如权利要求2所述的用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，其特征在于，所述细胞
增殖制剂进一步包括咖啡酸。
4.如权利要求3所述的用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，其特征在于，所述咖啡
酸的浓度为20?120μmol/L，优选40、60或80μmol/L。
5.如权利要求4所述的用于美容软骨细胞培养及再生的培养基，其特征在于，所述基础
培养基选自DMEM或者DF12。
6.一种用于美容软骨细胞培养及再生的细胞增殖制剂，其特征在于，所述增殖制剂包
括芦荟大黄素和咖啡酸。
7.一种美容软骨细胞增殖及再生的方法，其特征在于，包括：
(1)采用酶消化法从供体获取软骨细胞；
(2)将所述软骨细胞在权利要求1?5任一权利要求所述的培养基中培养；
(3)对培养增殖的美容软骨细胞进行纯化，保存备用。
8.芦荟大黄素和/或咖啡酸在制备用于美容软骨细胞培养及再生的细胞增殖制剂中的
用途。
9.权利要求1?5任一权利要求所述的培养基和/或权利要求6所述的细胞增殖制剂作为
信号因子在美容软骨细胞培养及再生中的应用，其特征在于，所述信号因子通过抑制Wnt?
5A/Ror2信号通路调控IL?1β诱导软骨细胞的增殖及再生。
10.一种美容软骨细胞，其特征在于，所述美容软骨细胞采用权利要求1?5任一权利要
求所述的培养基和/或权利要求6所述的细胞增殖制剂培养获得。