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在没有超声波破碎设备的情况下细胞破碎提取的方法还有哪些？

机械法

高压匀浆破碎法：使用高压匀浆器，由正向排代泵和排出阀组成。细胞浆液在高压下通过排出阀的小孔高速冲出，射向撞击环，产生空穴爆炸、撞击效应和剪切效应，从而破碎细胞。可单次或多次循环操作，也可连续操作，还能通过干冰调节入口温度控制温度上升。适用于细菌、酵母等微生物细胞以及动物细胞的大规模破碎。

振荡珠击破碎法：将组织样品与高密度珠子放入密封管中，加入缓冲液和稳定成分，通过高速振荡机振荡，使珠子与细胞相互碰撞、摩擦，达到破碎细胞的目的。适用于处理少量样本，如实验室中对少量细胞或组织的破碎。

高速搅拌珠研磨破碎法：利用高速珠磨机，将细胞悬浮液与研磨剂（如玻璃珠、陶瓷珠等）一起快速搅拌。细胞在研磨剂的撞击、摩擦和剪切作用下破碎。工业规模的细胞破碎常采用该方法，可用于各种细胞类型，包括细菌、真菌、植物细胞等。

组织捣碎机破碎法：将材料配成稀糊状液，置于筒内，盖紧筒盖，开动开关后，逐步加速至所需速度，通过旋转刀片的机械切力破碎细胞。一般用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等，单次细胞破碎量在50-1000ml之间。

组织匀浆器破碎法：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动研杆，使细胞在研钵磨球和玻璃管内壁之间的狭小间隙中受到研磨和挤压而破碎。细胞破碎程度高，适用于量少的动物脏器组织。

非机械法

渗透压冲击破碎法：先将细胞放在高渗溶液中，如一定浓度的甘油或蔗糖溶液，细胞内水分向外渗出，细胞发生收缩。达到平衡后，将介质快速稀释或将细胞转入水或缓冲液中，由于渗透压突然变化，胞外水分迅速渗入胞内，使细胞快速膨胀而破裂。适用于一些对渗透压变化较为敏感的细胞，如动物细胞和某些细菌细胞。

冻融破碎法：将细胞置于低温环境冷冻，如-15℃左右，然后在室温下融化，反复多次。冷冻过程中细胞膜的疏水键结构破裂，增加细胞的亲水性能，同时胞内水结晶形成冰晶粒，引起细胞膨胀而破裂。对于细胞壁较脆弱的菌体，如某些细菌和酵母细胞，以及动物细胞，该方法较为适用。

酶溶破碎法：利用溶解细胞壁的酶处理菌体细胞，如溶菌酶可专一分解细菌细胞壁上糖蛋白分子的β-（1，4）糖苷键，使多糖分解。处理后的细胞移至低渗溶液中，细胞会破裂。也可采用自溶作用，通过加热或干燥等方法激活细胞内的自溶酶，使细胞自行破裂。适用于各种细胞类型，但需要根据不同细胞选择合适的酶。

化学破碎法：通过化学试剂溶解细胞或抽取胞内组分。例如，碱处理可以溶解除去细胞壁以外的大部分组分；酸处理可以使蛋白质水解成游离氨基酸。某些表面活性剂，如十二烷基硫酸钠（SDS）、TritonX-100等，能引起细胞溶解或使某些组分从细胞内渗漏出来。此外，脂溶性有机溶剂，如丁醇、丙酮、氯仿等，能溶解细胞膜上的脂质化合物，使细胞结构破坏，将胞内产物抽提出来，但这些溶剂容易引起生化物质破坏，使用时需在低温下操作，并注意分离回收溶剂。

本文由莱贸生物科技（上海）有限公司提供。