回拨人类发育时钟的魔法
——第一次讨论记录：ALS-iPScells的建立
第一幕问题
肌萎缩侧索硬化症
定义
具体病症、并发症、发病年龄、病程（与延髓麻痹、呼吸肌麻痹、肺部感染关系）
危险因素（与遗传关系）
*治疗方法（霍金）
*已建立的ALS体外研究模型
诱导多能干细胞
定义
IPS细胞特征
IPScells研究进展
临床保留脐带血的用途、脐带血与iPScells治疗的比较
克隆
定义
克隆技术发展（治疗性克隆发展缓慢的原因？）、伦理问题（为何哺乳类克隆更难？）
其他定义
干细胞
再生医学
其他问题
*其他ALS体外研究模型建立方法
*2012年诺贝尔医学与生理学奖内容
第二幕问题
HDF
为何选择HDF建立iPScells、其他常用细胞（取材、重编程效率的比较）
为何选取正常人皮肤（设置对照组的意义）
转染
定义
是否导入核？
如何判断有效导入
*过程
*电转原理
实验技术、实验结果相关问题
如何检测基因突变（westernblot）
本案例体外细胞与分子生物学实验、体内动物实验具体内容
传代次数对实验的影响
内源性表达、外源性沉默的意义
*皮肤微创取材技术
其他问题
*其他iPScells建立方法
*生物医学伦理委员会的功能。
*案例中出现的质粒组合?
其他定义
Episomal质粒电转
重编程质粒、重编程因子
hESC样克隆
RT-PCR
Nanog（内源干细胞标志物）
问题总结（标*仅做了解）
肌萎缩侧索硬化症ALS
定义
具体病症、并发症、发病年龄、病程（与延髓麻痹、呼吸肌麻痹、肺部感染关系）
危险因素（与遗传关系）
*治疗方法（霍金）
*已建立的ALS体外研究模型
诱导多能干细胞iPS
定义
IPS细胞特征
IPScells研究进展
*临床保留脐带血的用途、脐带血与iPScells治疗的比较
治疗性克隆
定义
克隆技术发展（治疗性克隆发展缓慢的原因？）、伦理问题（为何哺乳类克隆更难？）
人皮肤成纤维细胞HDF
为何选择HDF建立iPScells、其他iPScells建立方法（常用细胞取材、重编程效率的比较）
为何选取正常人皮肤（设置对照组的意义）
转染
定义
是否导入核？
如何判断有效导入
*过程
*电转原理
实验技术、实验结果相关问题
基因突变位点检测（westernblot）
本案例体外细胞与分子生物学实验、体内动物实验具体内容
传代次数对实验的影响
内源性表达、外源性沉默的意义
*皮肤微创取材技术
其他定义
干细胞
再生医学
Episomal质粒电转
重编程质粒、重编程因子
hESC样克隆（图1）
RT-PCR
Nanog（内源干细胞标志物）
其他问题
*其他ALS体外研究模型建立方法
*2012年诺贝尔医学与生理学奖内容
*生物医学伦理委员会的功能。
*案例中出现的质粒组合?