第2节动物细胞工程;1.举例说出动物细胞融合的概念、原理及应用。

2.阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程。

3.认同单克隆抗体在临床上有重要的应用价值。

;我们知道，运用植物体细胞杂交技术，可以跨越不同种植物之间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型。那么，有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢?;动物细胞融合技术就是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。;原生质体融合方法：

物理法：电融合法、离心法

化学法：聚乙二醇融合法、

高Ca2+-高pH融合法;仙台病毒;正在融合的鸡血细胞;植物体细胞杂交和动物细胞融合比较;;1.抗体;;;;;单克隆抗体制备的过程：;单克隆抗体制备的过程：;克隆化培养和抗体检测;补充了解——克隆化培养和抗体检测;单克隆抗体制备的过程：;;;补充了解——HAT选择培养基的筛选原理

①细胞合成DNA有两条途径，正常细胞内两种途径都有，若全合成途径被阻断，可以通过补救合成途径合成DNA；

②骨髓瘤细胞不能合成转化酶和激酶，因此只能进行全合成途径；

③全合成途径能被氨基喋（dié）呤（A）阻断；

④次黄嘌呤（H）、胸腺嘧啶（T）是补救合成途径的原料；

⑤无增殖能力的细胞在培养基中存活仅5-7天，细胞的多聚体也容易死去。

将诱导融合后的细胞接种于HAT培养基后两周，则细胞生存状况及原因为：

B细胞和B-B细胞________________________________________

骨髓瘤细胞和瘤-瘤细胞__________________________________________

杂交瘤细胞_____________________________________________;单克隆抗体的应用;甲胎蛋白（AFP）是一种特异性较强的肿瘤标志物，用甲胎蛋白作为______免疫小鼠，制备__________________，并与含有放射性同位素的标记物连接，单克隆抗体携带放射性标记物通过血液可到达全身几乎所有组织。由于肿瘤细胞表面的______会和单克隆抗体特异性的结合，所以放射性同位素标记物就不断积累在______上。通过一定的显影技术就可以发现肿瘤所在。;资料2.使用高效的细胞毒素类药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞。但细胞毒素没有特异性，在??伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害，这限制了它在临床上的应用。抗体—药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如下图所示。;制成“生物导弹”;本堂小结