动物克隆技术用于拯救濒危动物也受到广泛的关注。中国科学院动物研究所陈大元研究员提出用动物克隆技术拯救大熊猫的计划,在国内外均引起一定的反响。第95页,共142页,星期日,2025年,2月5日克隆宠物2004年8月6日美联社报道:美国加州“遗传储存与克隆”公司近日正式宣布,他们成功地培育出了世界上首对克隆宠物猫,今后,他们将在世界范围内推广宠物克隆业务,需要交纳5万美元的“克隆费”,你家的宠物就可以有个一模一样的伙伴了。第96页,共142页,星期日,2025年,2月5日由于克隆动物的遗传背景相同,因此它们是模拟疾病、基因治疗、器官移植等研究的良好实验材料,具有良好的稳定性和重复性。利用克隆技术,可以用患者本人细胞培育出新组织,用来治疗糖尿病、帕金森氏症、神经损伤等多种疾病。用这种方法培育出的组织不会产生免疫排斥反应8.2.4.3医药领域具有与患者正常组织完全相同的基因构成第97页,共142页,星期日,2025年,2月5日随着人类胚胎干细胞培养技术的完善,科学家已开始研究利用克隆技术培育人胚胎,希望大批量生产治疗疾病的干细胞。移植器官来源不足是各国存在的普遍问题,所以人们开始致力于异种器官移植和克隆器官移植的研究。人们可以用克隆动物的胚胎干细胞作异源移植,以解决人类移植器官供求矛盾。8.2.4.3医药领域第98页,共142页,星期日,2025年,2月5日目前我国的年器官移植数量已经位居世界第二,其种类和成功率也都达到或接近国际先进水平。但还存在着基础研究薄弱、研究体系分散和社会捐献活体器官意识不强、数量较低以及相应立法不完备等问题。第99页,共142页,星期日,2025年,2月5日未来人类器官移植治疗将集中在人对人的同体器官移植、动物对人的异体器官移植和克隆人体器官移植等方面。其中克隆人体器官更具有光明的前景,将解决一系列移植方面的关键问题,不过目前其实际运用还为时过早,因为虽然现在可以复制具有机械功能的脏器,但如何还原其生化作用还有待于探索。第100页,共142页,星期日,2025年,2月5日(二)去卵膜和卵核可用小镊子在解剖显微镜下仔细剥去卵膜,或用适当的胰蛋白酶溶液软化卵膜,经过轻轻晃动,使卵子从中脱出。鱼卵----极细的玻璃微针借助第二极体标志(卵核位于极体下方)挑出细胞核。两栖类----紫外线照射受体卵达到去核目的。第63页,共142页,星期日,2025年,2月5日(三)供体细胞制备将发育至囊胚期的胚胎或组织器官进行机械切割,置于胰蛋白酶溶液中处理几分钟,直至分离出单个细胞。也可将囊胚细胞或得到的离体细胞短期培养后用作供体。第64页,共142页,星期日,2025年,2月5日(四)移核由于细胞核极小,而且脆弱,因此需要极其小心,防止损伤细胞核或伤害到细胞质。实际上核移植时,核周围的少量细胞质也一起注射进了去核后的受体细胞中了。30-40min中内完成,温度:16-18℃第65页,共142页,星期日,2025年,2月5日克隆可以通过不同来源的细胞核移植来实现,如胚胎细胞、干细胞、成纤维细胞、体细胞等。其中以胚胎细胞克隆的应用比较普遍,以体细胞克隆的意义最大。8.2.3.3克隆动物一般制备技术第66页,共142页,星期日,2025年,2月5日移植细胞核的来源不同分为胚胎细胞核移植法胚胎干细胞核移植胎儿成纤维细胞核移植体细胞克隆技术第67页,共142页,星期日,2025年,2月5日(一)胚胎细胞核移植法将未着床的早期胚胎分散成单个的细胞,在电流的作用下,使单个细胞与去除染色体的未受精的卵母细胞融合。发育成胚胎后,移入受体妊娠产仔。第68页,共142页,星期日,2025年,2月5日原则上,一枚早期胚胎有多少个细胞,通过这种方法就可以克隆出多少个个体。还可将细胞反复克隆出更多的胚胎,产生更多克隆动物。图8-2显示的是对胚胎细胞进行核移植克隆出动物的具体过程,由图8-2可以总结出图8-3所示的克隆动物培育的一般过程。第69页,共142页,星期日,2025年,2月5日第70页,共142页,星期日,2025年,2月5日1984年,英国科学家施特恩?维拉德申在仙台病毒或电激诱导下,成功地克隆了一只小绵羊,从此为家畜哺乳动物的克隆工作开启了先河。目前经此法克隆出的动物有小鼠、兔、山羊、绵羊、猪、牛、猴等。第71页,共142页,星期日,2025年,2月5日日本通过移植牛受精卵细胞核的方法于1945年克隆了两头雄性“孪生牛”