如何采用SDS-Hb法进行血红蛋白测定?1.HiCN法绘制标准曲线2.SDS-Hb法标准工作曲线绘制1)取4份不同浓度抗凝血或溶血液用HiCN法测定吸光度,并求出其Hb浓度。2)再用SDS-Hb法测定4份标本的吸光度。3)以4份标本Hb浓度为横坐标,SDS-Hb法测得的吸光度为纵坐标,绘制标准工作曲线。第31页,共71页,星期日,2025年,2月5日*分析前质量控制:同红细胞计数分析中质量控制技术误差:稀释倍数、分光光度计波长、光缝、比色杯光径需校正HiCN转化液:棕色玻璃瓶HiCN参考液:关键质控物:室内质控分析后质量控制:同红细胞计数质量控制第32页,共71页,星期日,2025年,2月5日*①成年:男性:120~160g/L;女性:llO~150g/L。②新生儿:170~200g/L。③老年(70岁以上):男性:94~122g/L;女性87~112g/L。参考值第33页,共71页,星期日,2025年,2月5日*①轻度贫血,成年男性Hb<120g/L,成年女性<110g/L;②中度贫血<90g/L;③重度贫血<60g/L;④极度贫血<30g/L。临床意义第34页,共71页,星期日,2025年,2月5日*三、红细胞形态检查红细胞大小、形态、染色和内涵物的是否异常第35页,共71页,星期日,2025年,2月5日1.显微镜分析法采用人工显微镜法血涂片染色观察,是仪器法校准的参考方法和检测的复核方法。2.计算机图像分析建立统计模型,以正常红细胞形态为参比、作出分析,可用于与红细胞形态变化疾病的辅助诊断。3.血液分析仪法提供红细胞数量及其他相关参数,对异常结果报警,但不能提供确切信息,需用镜检血涂片核实。
检测原理和方法学评价第36页,共71页,星期日,2025年,2月5日1.有合格的血液细胞形态检验人员2.选择细胞分布均匀区域进行镜检3.注意完整规范的检查顺序低倍镜细胞分布和染色油镜细胞形态,是否存在其他异常细胞4.减少人为影响因素全片浏览质量保证第37页,共71页,星期日,2025年,2月5日*第38页,共71页,星期日,2025年,2月5日*正常红细胞双凹圆盘形大小均一,平均7.2μm(6.7-7.7μm);淡粉红色,Hb充盈良好,中央部位为生理性淡染区,大小约为直径的1/3;胞质内无异常结。第39页,共71页,星期日,2025年,2月5日*第40页,共71页,星期日,2025年,2月5日外周血红细胞形态变化红细胞大小异常小、大、巨、大小不均红细胞性状异常球、椭圆、靶、口、镰、棘、钝锯齿、泪滴、裂片、形态不整血红蛋白充盈度与着色异常低色素、高色素、嗜多色、着色不一红细胞内异常结构嗜碱性点彩、豪焦小体、卡波环、寄生虫、疟色素红细胞排列异常缗钱状形成、自凝现象有核红细胞第41页,共71页,星期日,2025年,2月5日1.红细胞大小异常(1)小红细胞:指直径小于6μm的红细胞。提示血红蛋白合成障碍,见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。(2)大红细胞:指直径大于l0μm的红细胞,常见于巨幼细胞性贫血,也可见于溶血性贫血、恶性贫血等。第42页,共71页,星期日,2025年,2月5日第43页,共71页,星期日,2025年,2月5日(3)巨红细胞:指直径大于15μm的红细胞。最常见于巨幼细胞性贫血。(4)红细胞大小不均:指同一患者的红细胞之间直径相差一倍以上。大者红细胞直径可达12μm,小者直径仅2.5μm。常见于严重的增生性贫血,巨幼细胞性贫血时尤为明显第44页,共71页,星期日,2025年,2月5日第45页,共71页,星期日,2025年,2月5日第46页,共71页,星期日,2025年,2月5日2.红细胞形态异常(1)球形细胞:该红细胞在血液中为球形,而在涂片上则显示细胞中心着色深浓,体积较小,有球形之立体感。(2)椭圆形细胞:红细胞呈椭圆形、杆形,两端钝圆,长轴增大,短轴缩短。见于遗传性椭圆形细胞增多症、大细胞性贫血;偶见于缺铁性贫血、骨髓纤维化、巨幼细胞贫血、镰形细胞性贫血。正常人血液中约占l%,但不超过15%。第47页,共71页,星期日,2025年,2月5日第48页,共71页,星期日,2025年,2月5日(3)靶形细胞:红细胞中心部位和细胞周