斑片嶙瞄方法
松茸(Tricholomamatsutake)是一种深受人们喜爱的野生菌，又被称为“菌中之王”［1］,是生长在松树、栋树根部
的真菌，主要分布在我国的四川、西藏、云南等高原地区［2］。它富有多种植物多糖、氨基酸、蛋白质、多肽类、酚类及
菇类等［3］活性成分，味道鲜美，富有很高的医疗和药用价值，使用历史悠久［4］,而且是一种珍稀的药食两用真菌，被列
为二级濒危保护物种［5］。近年来，对其营养成分6-葡聚糖的研究逐渐引起了越来越多人的关注［6］op-葡聚糖也存在于一
些真菌如酵母的细胞壁上，具有较强的免疫功能［7-8］,能够降血脂、抵抗辐射、缓解疲劳和改善肠道功能等［-10］。彳艮
多国家已将酵母伊葡聚糖作为日常的营养补充原料使用，且很多种类的食物中都允许添加，比如功能性饮料、乳制品、
烘焙食品和压片糖果等。2012年，国家原卫生部公布的第6号公告就已经将较大婴儿的配方奶粉列入酵母葡聚糖的
使用范围内。酸奶片是以牛奶粉、羊奶粉、驼奶粉等的发酵产物为主要原料，适量添加黏合剂、填充剂等辅料，经搅拌
混合、干法或湿法制粒，以及压片等工艺而制成的片状乳制品。其作为一种假日旅游食品，具有体积小、易携带、方便
食用等特点，深受不同群体的喜爱［11］o现阶段能够见到的奶片制品有益生菌奶片［12-13］、果蔬奶片［14-20］等，而将松
茸(经发酵)与奶粉相结合制成的富含葡聚糖酸奶片未见报道。本研究针对市场需求，开发一款将松茸、益生菌和乳
粉结合起来做成富含B-葡聚糖的酸奶片，填补该类型食品领域空白，满足人们对营养价值的更高需求。
1材料与方法
1.1材料与试剂
新鲜松茸，昆明市大观农贸市场；奶粉，超市普通奶粉；白砂糖，云南省红河糖业有限公司；赤薛糖醇，保龄宝
生物股份有限公司；酿酒酵母，北京北纳创联生物技术研究院，菌种编号：BNCC300560；酸奶发酵剂(嗜酸乳杆菌、
保加利亚乳杆菌、植物乳杆菌、嗜热链球菌、干酪乳杆菌、麦芽糊精)，北京川秀科技有限公司；麦芽汁培养基，青岛
青药生物工程有限公司；葡聚糖标准品，北京万佳首化生物科技有限公司；“来伊份”益生菌酸奶片，昆明大观沃尔玛
超市；地衣聚糖酶(Units5000),上海安谱实验科技股份有限公司；葡萄糖昔酶(100U-g-1),成都欧恩瑞思化学
试剂有限公司；葡萄糖氧化酶(250U-mg-1),过氧化物酶(250U-mg-1),上海源叶生物科技有限公司；其他试剂
均为国产分析纯。
1.2仪器与设备
BL-200S电子天平，丹纳赫西特传感工业控制(天津)有限公司；PHS-3CpH计，雷磁分析仪器厂；TG电热
鼓风干燥箱，黑龙江迪尔制药机械有限公司；BI-250A低温生化箱，施都凯仪器设备(上海)有限公司；JC-FW-200粉
碎机，青岛聚创嘉恒分析仪器有限公司；HH-2数显恒温水浴锅，金坛区西城新瑞仪器厂；1850离心机，湖南湘仪实
验室仪器开发有限公司；DHS-16水分测定仪，上海力辰帮西仪器科技有限公司；SCIENTZ-100F/A冷冻干燥机，宁波
新芝冻干设备股份有限公司；ZP-170旋转式压片机，上海绿翊机械制造有限公司；UV-5200紫外可见分光光度计，上
海元析分析仪器有限公司；LC-20A高效液相色谱仪，日本岛津公司。
1.3实验方法
1.3.1松茸粉的制备
松茸子实体先用刀轻轻刮去表面泥土等异物，用水多次洗净，置于60°C干燥箱中鼓风干燥，粉碎至60目，加入
纯净水，料液比1:8,置于水浴锅中，于0°C加热30min灭菌，冷藏备用。
1.3.2菌悬液制备
将酿酒酵母冻干粉接入麦芽汁液体培养基进行活化，活化2代后，4000r-min-1离心20min,弃去上清液，用无
菌生理盐水清洗、离心2次，再用生理盐水分散沉淀得到活菌数为107CFU?mL-1的菌液。
1.3.3松茸发酵（松茸一次发酵）
在松茸溶液中接入10%的菌液，30°C静置24h。
1.3.4酸奶制备（松茸二次发酵）
松茸发酵液180目过滤，取少许滤液减压浓缩、干燥打粉，测定其中葡聚糖含量。加入滤液12%的奶粉，再
加入0.1%质量比的酸奶发酵粉，37°C保持8h,冷冻干燥即得到松茸酸奶粉。
1.3.5松茸酸奶片的制备
为避免湿法制粒过程中酒精对益生菌的渗透灭活影响，本实验采用干法制粒，然后压片。工艺流程：辅料混合一
干法制粒一整粒一压片一包装。称取松茸酸奶粉与辅料混合均匀