1.紫外可见吸收光谱图1为模拟生理条件下，大黄酸UV吸收光谱及大黄酸一BSA体系的UV吸收差谱。由图可见，大黄酸220nm处吸收峰强度有规律地降低并且峰位发生红移。说明大黄酸与BSA之间有显著的相互作用，同时也说明它们的相互作用使该共轭体系的能级发生了明显的变化。应用实例2：光谱及电化学方法研究大黄酸与牛血清白蛋白的相互作用—光谱学与光谱分析,2011,31(9):2446-2449第31页，共62页，星期日，2025年，2月5日2.圆二色谱法为研究大黄酸与BSA作用过程中BSA二级构象的变化，对比测试了BSA及大黄酸-BSA体系的圆二色谱。由图5看出应用实例2：光谱及电化学方法研究大黄酸与牛血清白蛋白的相互作用b和C的CD波谱相对于a有明显的红移现象，表明大黄酸与BSA结合改变了BSA空间构象。第32页，共62页，星期日，2025年，2月5日概念：在溶液中加入表面活性剂，不仅增溶，更重要的是增大传统分光光度法的灵敏度。特点：摩尔吸光系数增大，峰红移高配位、多元络合物，分子截面积a大ε＝0.87×1020pa光吸收强度与整个光谱带的积分吸收强度有关εmax与截面积有关，也受半峰频宽的约束（一）胶束增溶分光光度法第四节拓展：其他新型光度分析法第33页，共62页，星期日，2025年，2月5日能显著降低水的表面张力的物质为表面活性剂SurfaceActiveMaterial表面活性剂-概念非表面活性剂无机盐，蔗糖，甘露醇非表面活性剂醇，醛，酸，酯表面活性剂肥皂浓度在0.2%时表面张力降至40％分子结构：两亲分子亲水基hydrophilicgroup憎水基hydrophobicgroup第34页，共62页，星期日，2025年，2月5日离子与非离子型表面活性剂-分类阳离子型伯仲叔季胺盐，烷基吡啶阴离子型羧、磺酸盐，硫、磷酸酯盐两性型氨基酸、甜菜碱型非离子型聚氧乙烯、多元醇型第35页，共62页，星期日，2025年，2月5日表面活性剂-C.M.C.胶束的形成C.M.C.CriticalMicelleConcentration形成胶束所必需的最低浓度胶束增溶作用形成胶束后，难溶物水中溶解度显著增大。微环境不同含不溶性脂肪醇的烷基硫酸盐溶液稀释，变浑浊拟均相萃取第36页，共62页，星期日，2025年，2月5日埃铬菁R＋Be2＋(pH6.9)C.M.C.以上的Zeph存在，增敏Zeph氯化十四烷基二甲基苄基铵埃铬菁R胶束增溶分光光度法-实例第37页，共62页，星期日，2025年，2月5日胶束增溶分光光度法-实例有Zeph595nm最大Be:ECR=1:1无Zeph522nm最大Be:ECR=1:2第38页，共62页，星期日，2025年，2月5日胶束增溶分光光度法-非离子型表面活性剂的增溶/增稳/增敏实例金属－双硫腙体系传统：用CHCl3或CCl4萃取TritonX-100增溶水相直接测定铜锌等对-(1,1,3,3,-四甲基丁基)-苯基醚Fe(III)－SCN体系分级络合，还原退色，10m退10％加TritonX-100灵敏度提高1倍，12h稳定第39页，共62页，星期日，2025年，2月5日（二）流动注射分光光度法优点：分析速度快、准确度和精密度高、节省试剂和样品、可与各种检测技术、分离技术结合。广泛应用于快速分析、过程分析及在线分析。第40页，共62页，星期日，2025年，2月5日2.2.第41页，共62页，星期日，2025年，2月5日2.第42页，共62页，星期日，2025年，2月5日2.第43页，共62页，星期日，2025年，2月5日（二）流动注射分光光度法流动注射分析方法的发展1.1连续流动分析技术连续流动分析技术(continuousflowanalysis，CFA)是基于在管道中将连续流动的试样溶液用空气按一定的间隔规则地隔开，然后按顺序和比例混入试剂溶液，在通过混合圈的过程中完成反应，除去气泡后，进入检测器。这种技术采用空气间隔能有效地防止各段试样间的相互混合，因此它曾在自动分析领域中得到广泛应用，但气泡的存在会带来许多问题。第44页，共62页，星期日，2025年，2月5日关于紫外可见分光光度法PPT第1页，共62页，星期日，2025年，2月5日*第一节基本原理一、紫外-可见吸收光谱（UV-VIS光谱）紫外-可见分光光度法起源：价电子能级跃迁由于分