枸杞中双丙环虫酯的测定液相色谱-串联质谱法
1.范围
本文件规定了枸杞中双丙环虫酯含量的液相色谱-串联质谱测定方法。
本文件适用于枸杞中双丙环虫酯含量的测定和确证。
2.规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日
期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改
单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。
3.术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4.原理
样品经混匀，乙腈提取，提取液经分散式固相萃取净化，离心，过滤，液相色
谱-串联质谱仪测定，外标法定量。
5试剂和材料
除另有说明，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。
5.1试剂
5.1.1甲酸(HCOOH)：色谱纯。
5.1.2乙腈(CH3CN)：色谱纯。
5.1.3无水硫酸镁（MgSO4）：分析纯。
5.1.4N-丙基乙二胺(N-primarysecondaryamine,PSA)：分析纯。
5.1.5十八烷基键合硅胶吸附剂（C18）：分析纯。
5.1.6氯化钠（NaCl）：分析纯。
5.2溶液配制
5.2.10.1%甲酸水溶液：取100μL甲酸(5.1.1)，用超纯水定容至100mL混合均匀
5.3标准品
双丙环虫酯标准物质：纯度均不低于99%，CAS:915972-17-7。分子式：C33H39NO9。
5.4标准溶液制备
5.4.1标准储备液（10μg/mL）：准确称取适量的标准物质（5.3），用乙腈（5.1.2）制
备浓度为10μg/mL的标准储备液，于－18℃冰箱中避光保存。
5.4.2标准中间溶液的配制（1.0μg/mL）：将双丙环虫酯的标准储备液用乙腈配制成质量
浓度为1.0μg/mL的标准中间溶液，于－18℃冰箱中避光保存。
5.4.3基质标准工作溶液的配制：移取适当体积的标准溶液，用阴性样品提取液将双丙环虫
酯配制成质量浓度为1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0ng/mL的标准工作液，现用现配。
6仪器和设备
6.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾电离源。
6.2分析天平：感量为0.00001g0.01g。
6.3高速离心机：15000r/min。
6.4涡旋混合器。
6.5具塞塑料离心管。
6.6超声波振荡器。
6.7微孔滤膜（水相）：0.22μm。
7分析步骤
7.1试样制备
将枸杞样本取可食用部分，混合均匀，搅拌破碎，装入密闭洁净容器中标记明示。
7.2试样的提取
称样5g于50mL离心管中，加入5mL水、20mL乙腈、2g氯化钠，垂直振荡5min，
4000r/min离心5min。取上清液1mL，加入150mg无水硫酸镁、25mgPSA、25mgC18，
涡旋振荡1min，4000r/min离心5min，取上清液0.5mL，加0.5mL0.1%甲酸水溶液1
mL，混合均匀，过0.22μm滤膜于进样小瓶中，待测。
7.3仪器参考条件
7.3.1液相色谱参考条件
a)色谱柱：AcquityBEHC18色谱柱（100mm×2.1mm，3.5μm),或相当者；
b)柱温：30℃；
c)进样量：5μL；
d)流速：0.25mL/min；
e)流动相A：0.1%-甲酸水溶液（5.2.1），流动相B：乙腈（5.1.2）。梯度洗脱条件
见表1。
表1流动相及梯度洗脱条件
时间t/min流动相A(%)流动相B(%)
0.005050
2.004590
2.40